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文献和实验Inverse PCR & Cycle Sequencing
1) Mix the following in 200 ul PCR tubes: ABI BigDye Mix 3.0 ul PCR Template 2.5 ul Primer (1 uM) 1.5 ul 5X ABI dilution buffer 1.5 ul ddH2 O 6.5 ul 2) Cycle Sequence in a Perkin-Elmer 9700
/ul) q.s. sterile ddH2O 12ul[alpha]-32-P-dATP (PB 10384) and [alpha]-35-S-dATP (SJ 1304) from Amersham.Dilute the Bst polymerase (BioRad 170-3406) in Bst dilution buffer.2. Incubate the reactions for 2 minutes at 67degC, and briefly centrifuge
-dATP (PB 10384) and [alpha]-35-S-dATP (SJ 1304) from Amersham. Dilute the Bst polymerase (BioRad 170-3406) in Bst dilution buffer. 2. Incubate the reactions for 2 minutes at 67℃, and briefly centrifuge to reclaim condensation. 3. Remove 2.5 μl
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