质粒库-pEF1a-BirA-V5-neo

质粒库-pEF1a-BirA-V5-neo参数（本网页说明仅供参考，具体资料欢迎详询客服）
培养条件:37度
表达宿主:大肠杆菌BL21 DE3
培养条件:37℃，有氧，LB
诱导方式:IPTG或乳糖及其类似物
5＇测序引物:pGEX5: GGGCTGGCAAGCCACGTTTGGTG
3＇测序引物:pGEX3: CCGGGAGCTGCATGTGTCAGAGG
备注:可用GST亲和柱纯化重组蛋白
质粒宿主：大肠杆菌；哺乳细胞；酵母菌；噬菌体；乳酸菌；枯草杆菌；丝状真菌；等
质粒用途：蛋白表达；基因编辑；诱导染色；定位杂交等
片段类型：ORF；cDNA；shRNA；sgRNA；ncRNA；miRNA；cirRNA等
片段物种：空载体
原核抗性：Amp

质粒库-pEF1a-BirA-V5-neo到货后请根据标签上文字判断产品属性（质粒/甘油菌）
1、收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl无菌水溶解质粒，室温放置1min；
 2、从-80℃冰箱中取出相应的感受态，置于冰盒上解冻，并做好标记；
 3、取2μl质粒加至100μl感受态中，冰浴30min；
 4、42℃热激90s，再冰浴2min；
 5、加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡培养45min；
 6、6000rpm离心5min，仅留100ul上清混匀菌体沉淀；
 7、混匀后的菌液加至对应抗性的LB平板上，倒入适量玻璃珠，涂匀液体；
 8、将平板正向培养1h，再倒置培养12h~16h；
 9、挑取单克隆菌落至对应抗性的LB液体培养基中，震荡培养12h~16h，根据实验需要提取质粒。
质粒转化前请准确查找该质粒相应的抗生素名称、抗生素使用浓度、感受态名称和培养温度。
pECMV-3×FLAG-E2F7(human)(569-879aa)-SV40-Neo    哺乳细胞    蛋白表达    ORF    人    Amp    Neo/G418    
pEnCMV-USP49(human)-3×Myc-SV40-Neo    哺乳细胞    蛋白表达    ORF    人    Amp    Neo/G418    
pEnCMV-TNFSF4(mouse)-3×FLAG-SV40-Neo(1同义突变)    哺乳细胞    蛋白表达    ORF    小鼠    Amp    Neo/G418    
pEnCMV-CTLA4(human)-1-3×FLAG-SV40-Neo    哺乳细胞    蛋白表达    ORF    人    Amp    Neo/G418    
pEnCMV-SLC26A5(mouse)-3×FLAG-SV40-Neo    哺乳细胞    蛋白表达    ORF    小鼠    Amp    Neo/G418    
pCDH-CMV-ANXA1(human)-EF1a-Puro    哺乳细胞,慢病毒    蛋白表达    ORF    人    Amp    Puro    
pBV220-TNF(mouse)-Linker-mCherry    大肠杆菌    蛋白表达    ORF    小鼠    Amp        红色
pCDH-CMV-SIRT5(human)-EF1a-CopGFP-T2A-Puro(1同义突变)    哺乳细胞,慢病毒    蛋白表达    ORF    人    Amp    Puro    绿色
pEnCMV-ADAM22(human)-7-3×FLAG    哺乳细胞    蛋白表达    ORF    人    Amp    Neo/G418    
pEnCMV-USP4(human)-3×Myc-SV40-Neo    哺乳细胞    蛋白表达    ORF    人    Amp    Neo/G418    
pHAGE-CMV-TFEB(mouse)-3×FLAG-PGK-Puro    哺乳细胞,慢病毒    蛋白表达    ORF    小鼠    Amp    Puro    
pLentiCRISPR V2-U6-USP53(human)-sgRNA1    哺乳细胞,慢病毒    基因敲除    CRISPR,Cas9,sgRNA    人    Amp    Puro    
pLKO.1-U6-c-JUN(human)-shRNA2-hPGK-EGFP    哺乳细胞,慢病毒    干扰沉默    shRNA    人    Amp        绿色
pLKO.1-U6-c-JUN(human)-shRNA1-hPGK-EGFP    哺乳细胞,慢病毒    干扰沉默    shRNA    人    Amp        绿色
pLKO.1-U6-IBA57(human)-shRNA1-hPGK-EGFP    哺乳细胞,慢病毒    干扰沉默    shRNA    人    Amp        绿色
pCMV-Mem-mCherry-SV40-Neo    哺乳细胞    亚细胞定位    ORF        Kan    Neo/G418    红色
pBlueScriptR-PARP12(human)    大肠杆菌    基因模板    cDNA    人    Amp