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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
大量
- 供应商:
南京万木春生物
- 检测范围:
可根据客户要求调整
- 检测方法:
竞争法/夹心法
- 应用:
仅供科研,不得用于临床
- 适应物种:
标题物种
- 标记物:
HRP
- 样本:
血清、血浆、细胞上清液、组织匀浆
- 规格:
48T/96T
试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被颗粒酶B(Gzms-B)抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的颗粒酶B(Gzms-B)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。
样品收集、处理及保存方法
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。
3. 细胞上清液:3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。
5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
自备物品
- 酶标仪(450nm)
- 高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
- 37℃恒温箱
- 试剂盒保存在2-8℃,使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶,这属于正常现象,水浴加热使结晶完全溶解后再使用。
- 实验中不用的板条应立即放回自封袋中,密封(低温干燥)保存。
- 浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白;按照说明书操作时样本已经稀释5倍,最终结果乘以5才是样本实际浓度。
- 严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。
- 所有液体组分使用前充分摇匀。
注:标准品(S0-S5)浓度依次为:0、1、2、4、8、16 pg/mL
试剂的准备
20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按1:20稀释,即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。
洗板方法
- 手工洗板:甩尽孔内液体,每孔加满洗涤液,静置1min后甩尽孔内液体,在吸水纸上拍干,如此洗板5次。
- 自动洗板机:每孔注入洗液350μL,浸泡1min,洗板5次。
- 从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。
- 设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;
- 样本孔先加待测样本10μL,再加样本稀释液40μL;空白孔不加。
- 除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
- 弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。
- 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
- 每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。
绘制标准曲线:在Excel工作表中,以标准品浓度作横坐标,对应OD值作纵坐标,绘制出标准品线性回归曲线,按曲线方程计算各样本浓度值。
试剂盒性能
- 准确性:标准品线性回归与预期浓度相关系数R值,大于等于0.9900。
- 灵敏度:最低检测浓度小于0.1pg/mL。
- 特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
- 重复性:板内、板间变异系数均小于15%。
- 贮藏:2-8℃,避光防潮保存。
- 有效期:6个月
南京万木春生物简介
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文献和实验人空腹血糖一般为3.9~6.1mmol/L.市场上单、双试剂的商品化试剂盒都有,可用终点法(单试剂)或两点终点法测量(双试剂)。 门冬氨酸氨基转移酶(AST):又称为谷草转氨酶(GOT),主要用于心肌和肝胆疾病及骨骼肌病的诊断。是肝功能测试的常用指标之一。正常人一般在40U/L以内。同ALT一样,无论单、双试剂,用动力学法可计算结果。 碱性磷酸酶(ALP):主要用于肝胆疾病及骨骼病的诊断。医学教|育网搜集整理是肝功能测试的常用指标之一。正常人一般在240U/L以内。用动力学法计算结果。
。通过蛋白的测定可以协助某些疾病的诊断。 血糖:血液中的葡萄糖简称血糖(GLU)。常用于糖尿病的诊断。正常人空腹血糖一般为3.9~6.1mmol/L.市场上单、双试剂的商品化试剂盒都有,可用终点法(单试剂)或两点终点法测量(双试剂)。 门冬氨酸氨基转移酶(AST):又称为谷草转氨酶(GOT),主要用于心肌和肝胆疾病及骨骼肌病的诊断。是肝功能测试的常用指标之一。正常人一般在40U/L以内。同ALT一样,无论单、双试剂,用动力学法可计算结果。 碱性磷酸酶(ALP):主要用于肝胆疾病及骨骼病的诊断
桔霉素(Citrinin) 酶联免疫分析( ELISA ) 试剂盒使用说明书 本试剂盒仅供研究使用。 1 使用目的: 本试剂盒用于饲料、鱼、虾和肉类组织(如鸡、牛肉和猪肉),鸡蛋、蜂蜜、牛奶、血清和尿样中桔霉素 (Citrinin) 残留的定量检测。 2 实验原理 本试剂盒采用竞争 ELISA 方法,在微孔板包被有 桔霉素 (Citrinin) 偶联抗原,加入
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