AapCas12b/cas12/CRISPR检测用酶

【储存条件及有效期】
有效期1年，保存条件-20°C；如长期储存，建议置于-80°C。
建议根据使用次数进行分装，避免反复冻融。
【产品特点】
采用一步法纯化制备，保留酶活性，经过测试酶活性显著高于同类产品。
【活性定义】
在总体积为20 μL的反应体系中，60℃反应条件下，1 min内剪切1 pmol ssDNA探针所需的Cas12b酶量定义为1 transU。
例：若某批次AapCas12b酶的反式切割活性为 30 transU/pmol，则表明1 pmol的该批次AapCas12b酶可在1 min内，在上述指定的反应条件下，反式切割30 pmol的ssDNA探针。
【质量保证】
样品纯度：～95% （SDS-PAGE鉴定）。

【检测步骤】
需要准备的其它试剂

1. Reporter：Cas12b切割底物，即在剪切反应体系中加入ssDNA报告探针，该探针5′端标记荧光报告基团(FAM)，3′端标记荧光淬灭基团(BHQ1)。可搭配我司的 Reporter进行检测，或自行设计合成Reporter。
2. crRNA/gRNA：与 Cas12b 结合，形成功能复合物，被目标序列特异性激活。可选择我司的crRNA或自行设计合成crRNA。

产品名称	编号
ssDNA reporter（DNA探针）	EDD0001

名称	规格	编号
crRNA生物合成	2OD	EDR0002
crRNA化学合成	2OD	EDR0003

1. 恒温扩增反应试剂盒。

【测试反应体系】

组分	终浓度	体积（μL）
10× Cleavage Buffer	1×	2 μL
5 μM AapCas12b Nuclease	150-250 nM	0.8 μL（200 nM）
500 nM crRNA	150-250 nM	8 μL（200 nM）
4 μM ssDNA Reporter	150-250 nM	1 μL（200 nM）
1 μM DNA target	150-250 nM	4 μL（200 nM）
DEPC H2O
Total	20 μL	20 μL

【反应条件】
使用实时荧光定量PCR仪或恒温扩增仪检测荧光信号，60℃反应，每 30 sec采集一次荧光信号。也可在紫外灯下直接观察荧光信号。

拍照示例


【注意事项】