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文献和实验,高压灭菌之后,再去内毒素。去内毒素方法很多,最简单可以放在烘箱180度3小时。或者过去内毒素的柱子后,高压灭菌。第二,各种溶液灭菌:抗生素用去内毒素水配制后,直接过滤除菌(过0.22u滤头)。可以用一次性无菌注射器过一次性0.22u滤头。现在用的培养液,如果是商业化液体培养基,不用处理。如果是粉末,需要用去内毒素水在生物安全柜(或超净工作台)进行配制,再过滤除菌。可以先配浓缩液(如10×),过滤除菌后。再用灭菌去内毒素水稀释成1×培养液。第三,完全培养液的配制:培养液加上合适比例的血清即可。但血清
式移液管操作,以防止在吸取样品时有气溶胶遗留。5)大体积样品应该用单独包装的无菌一次性移液管吸取。6)管子打开前都要简短离心以减少气溶胶的产生,而且管子不能用力崩开,这样会产生气溶胶。7)任何时候都应该穿实验服和带手套,手套要经常更换,尤其在抽提过程中每一步之间都要更换。实验服要专门用于样品准备间,经常清洗。2、样品准备和RNA-PCRRNA-PCR的额外步骤需要额外的样品操作,这样增加了样品之间污染的机会。为了避免这一问题,反转录一步可以在样品准备区进行。在RNA-PCR中应用UNG以防
5 ml灭菌双蒸水,即每毫升各为20万单位。 3.使用时溶入培养液中,使青链霉素的浓度最终为100单位/ml。1单位=1微克 (五)RPMI1640的制备与消毒 1.溶解、调PH值、定容:先将培养基粉剂加入培养液体积2/3的双蒸水中,并用双蒸水冲洗包装袋2-3次(冲洗液一并加入培养基中),充分搅拌至粉剂全部溶解,并按照包装说明添加一定的药品。然后用注射器向培养基中加入配制好的青链霉素液各0.5 ml,使青链霉素的浓度最终各为100单位/ml。然后用一个当量的盐酸和NaOH










