10mL血清移液管，橘色棉塞，独立包装，灭菌

细胞培养注意事项（入门级）

，高压灭菌之后，再去内毒素。去内毒素方法很多，最简单可以放在烘箱180度3小时。或者过去内毒素的柱子后，高压灭菌。第二，各种溶液灭菌：抗生素用去内毒素水配制后，直接过滤除菌（过0.22u滤头）。可以用一次性无菌注射器过一次性0.22u滤头。现在用的培养液，如果是商业化液体培养基，不用处理。如果是粉末，需要用去内毒素水在生物安全柜（或超净工作台）进行配制，再过滤除菌。可以先配浓缩液（如10×），过滤除菌后。再用灭菌去内毒素水稀释成1×培养液。第三，完全培养液的配制：培养液加上合适比例的血清即可。但血清

【分享】如何建立一个PCR实验室

式移液管操作，以防止在吸取样品时有气溶胶遗留。5）大体积样品应该用单独包装的无菌一次性移液管吸取。6）管子打开前都要简短离心以减少气溶胶的产生，而且管子不能用力崩开，这样会产生气溶胶。7）任何时候都应该穿实验服和带手套，手套要经常更换，尤其在抽提过程中每一步之间都要更换。实验服要专门用于样品准备间，经常清洗。2、样品准备和RNA-PCRRNA-PCR的额外步骤需要额外的样品操作，这样增加了样品之间污染的机会。为了避免这一问题，反转录一步可以在样品准备区进行。在RNA-PCR中应用UNG以防

培养基及无菌水的制备

。（5）包装：三角瓶棉塞头部应用锡箔纸包扎，试管集中于试管篓。2、无菌水的制备：（1）用10ml移液管量取9.2ml蒸馏水（稀释水）装入试管中。（2）用100ml量筒量取95ml蒸馏水（稀释水）装入150ml的三角瓶中。可置少许玻璃珠于三角瓶内，防止暴沸。（3）量取240ml蒸馏水（稀释水）于250ml的三角瓶中，塞上瓶塞用牛皮纸包扎好，高压灭菌备用。