- ￥165
- 翌圣生物（Yeasen）
- 15054ES92
- 上海翌圣
- 2025年11月06日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
现货
- 英文名：
FuniCut™ EcoRI (100 U/μL)
- 保质期：
2年
- 供应商：
翌圣生物科技（上海）股份有限公司
- 保存条件：
-20度
- 规格：
10000U
FuniCut™系列内切酶是通过基因工程重组技术，可在5~15 min内精确完成DNA切割的快速限制性内切酶，适用于快速切割质粒DNA、PCR产物、基因组DNA等。FuniCut™系列快速内切酶共用一种酶切缓冲液，从而简化了酶切反应体系，另外，有良好的酶活冗余度，可轻松处理底物过量或困难模板的酶切。
产品组分
| 组分编号 | 组分名称 | 产品规格 |
| 15054-A | FuniCut™ EcoRI (100 U/μL) | 100 μL |
| 15054-B | 10×FuniCut™ Buffer | 2×1 mL |
| 15054-C | 10×FuniCut™ Color Buffer | 2×1 mL |
运输与保存方法冰袋运输。-20°C保存，有效期2年。
识别位置5'-G↓AATTC-3'
3'-CTTAA↑G-5'
推荐反应条件
1× FuniCut™ 缓冲液；
最适37°C孵育。
失活条件80°C孵育20 min。
注意事项1）3 h孵育未表现星号活性，延时酶切可能出现星号活性；
2）受CpG甲基化影响，序列可能重叠，剪切受阻；
3）为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作；
4）本产品仅作科研用途！
使用方法
1. DNA快速酶切流程
1）按如下建议的加样顺序配制体系反应液（冰上操作）：
| 组分 | 质粒DNA | PCR产物 | 基因组DNA |
| ddH2O | 15.8 μL | 16.8 μL | 34 μL |
| 10×FuniCut™ Buffer或10×FuniCut™ Color Buffer | 2 μL | 3 μL* | 5 μL |
| 底物DNA | 2 μL（~1 μg） | 10 μL (~0.2 μg) | 10 μL (5 μg) |
| FuniCut™ EcoRI (100 U/μL) | 0.2 μL | 0.2 μL | 1 μL |
| Total | 20 μL | 30 μL | 50 μL |
2）轻柔吸打或轻弹管壁以混匀（切勿涡旋），然后瞬时离心以收集挂壁液滴。
3）37°C孵育15 min（质粒），或15~30 min（PCR 产物），或30~60 min（基因组 DNA）。
4）80°C孵育20 min即可使酶失活，停止反应（可选）。
2. 双酶切或多酶切
1）FuniCut™ EcoRI (100 U/μL)用量为0.2 μL，其余内切酶的用量为1 μL，并根据需要适当扩大反应体系。
2）所有内切酶的体积总和不得超过总反应体系的1/10。
3）如果选用的几种内切酶的最适反应温度不同，应先以最适温度低的酶开始酶切，再添加最适温度较高的酶，以较高的温度进行孵育。
3.质粒的扩大反应体系
| 组分 | 体积（20 μL） | 体积（20 μL） | 体积（50 μL） |
| DNA | 1 μg | 2 μg | 5 μg |
| FuniCut™ EcoRI (100 U/μL) | 0.2 μL | 0.4 μL | 1 μL |
| 10×FuniCut™ Buffer或10×FuniCut™ Color Buffer | 2 μL | 2 μL | 5 μL |
| Total | 20 μL | 20 μL | 50 μL |
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文献和实验1. 限制性内切酶反应一般在灭菌的0.5ml离心管中进行。 2. 20μl体积反应体系如下： DNA 0.2-1 μg 10×酶切buffer 2.0 μl 限制性内切酶 1-2 u（单位） 加ddH2O 至 20 μl 限制性内切酶最后加入，轻轻混匀，稍加离心，放置于最适温度水浴并按所需的时间温育
的 Eppendorf 管中,加 2μl 10 ×限制性内切酶缓冲液,6 ~ 10 个 U 的相应限制性内切酶,加消毒双蒸水至总体积 20μl ,于 37 ℃保温酶解 2 小时,按上述条件用适当的几种不同的内切酶进行单酶或双酶解。(2 )在 65 ℃加热 5 分钟或用适量的 0.5 mol / L EDTANa2 终止反应。2 .DNA 酶解片段的电泳分离取DNA 酶解作品 2μl 加上样缓冲液 10μl (含溴酚蓝指示剂和甘油),在 0.8 %琼脂糖(含 0.5μg / ml 溴化乙锭)凝胶进行水平电泳,电压
2.0 μl 限制性内切酶 1-2 u（单位） 加ddH2O 至 20 μl 限制性内切酶最后加入，轻轻混匀，稍加离心，放置于最适温度水浴并按所需的时间温育，一般为37℃水浴消化1hr。 3. 用于回收酶切片段时，反应总体积可达50-200μl，各反应组分需相应增加。 4. 多种酶消化时若缓冲液条件相同，可同时加入；否则，先做低温或低盐的酶消化，再做高温或高盐的酶消化。 5. 酶切结束时，加入0.5M
