Calbioreagents 单抗、多抗、纯化抗原、蛋白及偶

抗体选择

流式检测活细胞的表面蛋白，则需要选择含该表面蛋白的胞外域来免疫制备的抗体。   样本的提取或处理过程：某些抗体要求样本经过某些特殊处理，例如：许多抗体只识别还原和变性的、表位已暴露不受二级四级结构阻碍的蛋白样本，另一方面，某些抗体仅识别天然折叠状态的蛋白。当选择免疫组化的抗体时，应注意某些抗体只识别未固定的冷冻的组织，而另一些抗体则适用于无需抗原修复解交联步聚的甲醛固定石蜡包埋的组织，这些都会在抗体说明书上应用部分标示出来。   （4）抗体宿主物种的选择  

单克隆抗体的制备过程

也可以和多抗纯化完全一样。   用Protein A或Protein G纯化的好处是得到的单抗纯度相对较高，抗体活性保待也很好，操作方便，另外，由于它们和抗体的结合的区域位于抗体的Fc段，所以它们对大部份的抗体的亲和力表现得都差不多，所在在多克隆抗体的纯化过程中也可以用来浓缩其它方法纯化得到的较稀的抗体。但是这两种填料相对较贵，而且纯化单抗之前需要测定抗体的亚型。市场上还有一种重组的Protein A和G的重组蛋白偶联的填料，即Protein A/G，它综合了二者的优点，使纯化过程更加方便

多克隆抗体和单克隆抗体的比较

力或交叉反应，低亲和力通常是免疫亲和层析法存在的共同问题。使用单克隆抗体时，交叉反应并不常见，主要出现在某些抗体的亚类上，由于抗体与其他抗原上的相同表位结合所致。这些表位可能有广泛的同源性，这种性质单克隆抗体可用于这些相关蛋白的研究，而不能用于抗原的纯化。另一方面，交叉反应可能只限于表位本身。在这种情况下，使用针对该抗原中其他表位的单抗能够消除交叉反应。另一个解决办法就是采用其他层析或抽提技术从杂蛋白中纯化抗原。 3. 用混合的单克隆抗体进行免疫亲和层析 除特殊情况外，一般不应将混合单抗