- ￥178
- 雅酶
- OT102
- 2026年01月07日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 规格：
70片
WB专用转膜海绵垫(免滤纸)Ⅰ型
Foam Pads for Western Blot TypeⅠ
本产品常温运输；常温下长期有效。
货号规格
good70 片 96×80×5mm
使用说明
good1. 将海绵垫、凝胶和转印膜(PVDF 膜需要先用甲醇活化)置于转膜缓冲液中平衡 2 min左右；
good2. 装配转膜装置(三明治结构)：以雅酶或Bio-Rad 转印设备为例，打开转印夹，从负极(转印夹黑色一侧)开始依次铺上海绵垫、凝胶、转印膜，赶走胶与膜之间的气泡，再铺上另一张海绵垫。
注意事项
1. 转膜结束后，请将海绵垫用清水冲洗干净，以备下次使用；
2. 海绵垫出现破损或明显变薄，请更换新的海绵垫；
3. 本产品仅供科研使用。
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文献和实验缓冲液的铝盒中。 （6）SDS-PAGE 结束后，小心地剥下两块凝胶，一块用于考马斯亮兰染色观察电泳情况，另一块浸泡在转膜缓冲液中预平衡。海绵垫、滤纸、PVDF 膜及凝胶的预平衡时间在15 min - 1 hr 之间。 （7）将转膜夹子打开，使黑的一面保持水平。按照海绵垫、滤纸、凝胶、膜、滤纸和海绵垫的先后顺序铺垫，制备凝胶转移夹层。将膜与凝胶对齐。用玻璃棒赶走气泡。 （8）将夹子夹起来，扣紧，小心不要移动内层。放入电转槽中。使夹子的黑面对槽的黑面，夹子的白面对槽的红面。 （9）将电转槽放在冰水盒
对照 管家基因编码的、很多组织和细胞中都稳定表达的蛋白，用于检测整个WB实验过程及体系是否正常工作，并作为半定量检测目的蛋白表达量的标准对照。必须设立。 7.5上样与电泳 每孔上样量为20-40 μg蛋白，使用专用枪头或注射针头，勿溢出加样孔，电泳时间按电流仪说明书推荐方法使用,(1小时或过夜，取决于电压大小），当染料到达胶的底部，关电源停止电泳，胶不能存放，应立刻进行下一步的转膜。 8. 转膜与显色（Western Blot）
人提过的灌不同浓度的胶或者梯度胶，否则需要同时跑两块胶，因此也不是很推荐。个人经验认为300KDa以下8%胶（底边36KDa）都可以胜任，可以适当调整选择7-8%胶可以兼顾内参和大蛋白。转膜最好在低温进行（高温会局部溶胶或降低转膜效率），尽管很多半干转仪没有具体要求，但用预冷过的电转液湿滤纸比未预冷的转印效率更高。因此，有条件建议湿转、半干转均在低温（4度）进行。此外，湿转缓冲液可以考虑转印前-20度预冷，时间不能长于2hrs，否则电泳液冻结；mini3型有内置冰槽的，冰槽置-80度预冷。制作转膜
