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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 规格:
70片
WB专用转膜海绵垫(免滤纸)I型
Foam Pads for Western Blot Type I
本产品常温运输;常温下长期有效。
货号规格
good70 片 96×80×5mm
使用说明
good1. 将海绵垫、凝胶和转印膜(PVDF 膜需要先用甲醇活化)置于转膜缓冲液中平衡 2 min左右;
good2. 装配转膜装置(三明治结构):以雅酶或Bio-Rad 转印设备为例,打开转印夹,从负极(转印夹黑色一侧)开始依次铺上海绵垫、凝胶、转印膜,赶走胶与膜之间的气泡,再铺上另一张海绵垫。
注意事项
1. 转膜结束后,请将海绵垫用清水冲洗干净,以备下次使用;
2. 海绵垫出现破损或明显变薄,请更换新的海绵垫;
3. 本产品仅供科研使用。
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文献和实验缓冲液的铝盒中。 (6)SDS-PAGE 结束后,小心地剥下两块凝胶,一块用于考马斯亮兰染色观察电泳情况,另一块浸泡在转膜缓冲液中预平衡。海绵垫、滤纸、PVDF 膜及凝胶的预平衡时间在15 min - 1 hr 之间。 (7)将转膜夹子打开,使黑的一面保持水平。按照海绵垫、滤纸、凝胶、膜、滤纸和海绵垫的先后顺序铺垫,制备凝胶转移夹层。将膜与凝胶对齐。用玻璃棒赶走气泡。 (8)将夹子夹起来,扣紧,小心不要移动内层。放入电转槽中。使夹子的黑面对槽的黑面,夹子的白面对槽的红面。 (9)将电转槽放在冰水盒
对照 管家基因编码的、很多组织和细胞中都稳定表达的蛋白,用于检测整个WB实验过程及体系是否正常工作,并作为半定量检测目的蛋白表达量的标准对照。必须设立。 7.5上样与电泳 每孔上样量为20-40 μg蛋白,使用专用枪头或注射针头,勿溢出加样孔,电泳时间按电流仪说明书推荐方法使用,(1小时或过夜,取决于电压大小),当染料到达胶的底部,关电源停止电泳,胶不能存放,应立刻进行下一步的转膜。 8. 转膜与显色(Western Blot)
相关专题 生物实验中的封闭剂 经典的转膜方法是电转移,因为电转移需要配套垂直电泳槽 来进行。如何做这个“海绵—几层滤纸—胶—膜—几层滤纸—海绵”的“三文治夹心”,在分子克隆上已经有详细的介绍,相信大家都很容易找到。一些细节: 记得全程手套操作,一则避免手印污染影响结果,二则保护自己(未交联的丙烯酰胺、甲醛等等虽不立即致命但都会慢慢毒害你的身体,可不要这样白白为科学献身哈) 如果WB前没有可参考的资料——比如不











