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- 详细信息
- 文献和实验
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100
- 英文名:
/
- CAS号:
/
- 保质期:
1年
- 供应商:
优利科(上海)生命科学有限公司
- 保存条件:
2-8℃
- 规格:
50管/24样
中文名称:柠檬酸合酶(CS)测试盒(可见分光光度法)
货号:YLK0116
测试方法:可见分光光度法
产品规格:50管/24样
正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定
测定意义:
CS(EC 2.3.3.1)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞的线粒体基质中,是三羧酸循 环第一个限速酶,是三羧酸循环主要调控位点之一。
测定原理
CS 催化乙酰 CoA 和草酰乙酸产生柠檬酰辅酶 A,进一步水解产生柠檬酸;该反应促使无色 的 DTNB 转变成黄色的 TNB,在 412nm 处有特征吸光值。
本试剂盒仅供体外研究使用,不用于临床诊断!
需自备的仪器和用品
可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL 玻璃比色皿、研钵、冰、无 水乙醇和蒸馏水
试剂的组成和配制:
试剂一:液体 50mL×1 瓶,-20℃保存;
试剂二:液体 10mL×1 瓶,-20℃保存;
试剂三:液体 1mL×1 支,-20℃保存;
试剂四:液体 55mL×1 瓶,4℃保存;
试剂五:粉剂×1 瓶,4℃保存;
试剂六:粉剂×1 支,-20℃保存,临用前加入 2.4mL 蒸馏水,用不完的试剂仍-20℃保存。
样本的前处理: 组织、细菌或细胞中胞浆蛋白与线粒体蛋白的分离:
① 称取约 0.1g 组织或收集 500 万细胞,加入 1mL 试剂一和 10uL 试剂三,用冰浴匀浆器 或研钵匀浆。
② 将匀浆 600g,4℃离心 5min。
③ 弃沉淀,将上清液移至另一离心管中,11000g,4℃离心 10min。
④ 上清液即胞浆提取物,可用于测定从线粒体泄漏的 CS(此步可选做)。
⑤ 在步骤④的沉淀中加入 200uL 试剂二和 2uL 试剂三,超声波破碎(冰浴,功率 20%或 200W,超声 3 秒,间隔 10 秒,重复 30 次),用于线粒体 CS 测定。


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文献和实验其基本原理是:以PCR(聚合酶链式反应)为基础,结合了RFLP、RAPD的分子标记技术。把DNA进行限制性内切酶酶切,然后选择特定的片段进行PCR扩增(在所有的限制性片段两端加上带有特定序列的“接头”,用与接头互补的但3-端有几个随机选择的核苷酸的引物进行特异PCR扩增,只有那些与3-端严格配对的片段才能得到扩增),再在有高分辨力的测序胶上分开这些扩增产物,用放射性法、荧光法或银染染色法均可检测之。 一、 实验
柠檬酸发酵 citric-acid fermentation
属于氧化发酵形式之一,即从糖经过氧化而产生柠檬酸。最有名的生产菌是黑曲霉。其生产方法有以淀粉渣作基质的固体培养法和以糖液为基质的液体培养法。后者是根据环境条件所采用的适宜方法,如使用浅盘或转筒的表面培养法;依靠通气搅拌的深层培养法等。目前采用深层培养法进行生产的较多。关于柠檬酸的生成机制,一般认为由糖质产生的丙酮酸一部分,变成乙酰辅酶 A和另一部分与二氧化碳结合成草酰乙酸之后,通过柠檬酸合酶( synthase)的作用而生成柠檬酸。
摘要:研究了不同的溶液pH值对胶体金颜色!粒径的影响"在不同pH值下通过柠檬酸三钠法制备胶体金溶液,利用紫外/可见光吸收分光光度计对胶体金进行扫描,得到最大吸收峰波长及峰宽;通过透射电镜观察其颗粒直径及分布,再将二者结果进行比较分析"结果显示:随着溶液pH值变小,胶体金颜色由红y蓝y黑,粒径变大"关键词:胶体金;pH值;粒径;柠檬酸三钠法中图分类号:TG146131 文献标识码:A 文章编号:0258-7076(2005)04-0468-03
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