全能型DNA建库试剂盒

产品描述

 
Hieff NGS^® Ultima Pro DNA Library Prep Kit是针对Illumina^®和MGI^®高通量测序平台专业开发设计的新一代建库试剂盒。本产品采用高质量的酶学组成，在前一代建库试剂盒的基础上，改进了DNA片段末端修复和加A效率，同时改善了接头连接效率。本试剂盒采用新型的高保真酶，显著提高扩增均一性和保真性，可应用于常规动植物基因组、微生物基因组、FFPE、cfDNA、ChIP DNA等样本，助力获得优异的测序数据。

产品组分

 

 

运输与保存方法

 
冰袋运输。所有组分-20 °C保存，有效期1年。

 

注意事项

 
一、关于操作
1. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
2. 请于使用前将试剂盒各组分置于室温解冻。解冻后上下颠倒数次充分混匀，短暂离心后置于冰上待用。
3. 配制各步骤反应液时推荐使用移液器吹打混匀或轻轻振荡，剧烈振荡可能会造成文库产出下降。
4. 为避免样品交叉污染，推荐使用带滤芯的枪头，吸取不同样品时请更换枪头。
5. 推荐在带热盖的PCR仪中进行各步骤反应，使用前应预热PCR仪至反应温度附近。
6. PCR产物因操作不当极容易产生气溶胶污染，进而影响实验结果准确性。推荐将PCR反应体系配制区和PCR产物纯化检测区进行强制性的物理隔离；使用专用的移液器等设备；并定时对各实验区域进行清洁（使用0.5%NACLO或10%漂白剂进行擦拭清理），以保证实验环境的洁净度。
7. 本产品仅作科研用途！
 
二、关于DNA片段化
1. 本试剂盒中兼容机械法及酶切法片段化的DNA。
2. 本试剂盒兼容范围为100 pg - 1000 ng Input DNA。应尽可能使用A₂₆₀/A₂₈₀ = 1.8-2.0的高质量Input DNA。表1中列举了将本试剂盒应用于常见应用中推荐的Input DNA量。
表1  常见应用中推荐Input DNA量 【注】：上表为使用高质量DNA时推荐的Input DNA量，当Input DNA质量较差或需要进行片段分选时，应适当上调使用量。
3. Input DNA特指投入末端修复/dA尾添加步骤中的DNA。
4. Input DNA制备过程中带入的高浓度金属离子螯合剂或其他盐，可能会影响末端修复/dA尾添加步骤反应效率，建议DNA片段化后进行磁珠纯化或分选。当使用机械法进行DNA片段化且产物不进行纯化或长度分选而直接建库时，请将DNA稀释在TE Buffer中进行片段化，请勿在灭菌超纯水中进行。
 
三、关于接头连接（Adapter Ligation)
1. 针对Illumina^®测序平台，Yeasen提供Hieff NGS^® Complete Adapter Kit for Illumina®, Set 1~Set 2 (Cat#13519~Cat#13520)，试剂盒中的接头浓度为15 μM；Hieff NGS® 384 CDI Primer for Illumina®(Cat#12412~Cat#12413)，试剂盒中的接头浓度为
15 μM；Hieff NGS® Stubby UDI Primer Kit for Illumina® (Cat#12404~Cat#12407)，试剂盒中的接头浓度为15 μM；Hieff NGS® Dual UMI UDI Adapter Kit for Illumina®，Set1~Set2 （Cat#13370~Cat#13371），试剂盒中的接头浓度为15 μM。
2.针对MGI^® 高通量测序平台，Yeasen提供了Hieff NGS^® Complete Adapter Kit for MGI^®，Set 1~Set 3（Cat#13360 ~ Cat#13362），试剂盒中的接头浓度为10 μM；Hieff NGS^® 384 CDI Primer for MGI^®，Set 1~Set 2（Cat#13363 ~ Cat#13364），试剂盒中的接头浓度为10 μM；也可搭配Hieff NGS^® Dual UMI UDB Adapter Kit for MGI^®，Set 1~Set 2 (Cat#13367~Cat#13368)双端UMI UDB短接头，试剂盒中的接头浓度为10 μM。
3. Adapter的质量和使用浓度直接影响连接效率及文库产量。Adapter用量过高可能会产生较多Adapter Dimer；用量较低可能会影响连接效率及文库产量；使用Adapter时根据Input DNA量用TE Buffer进行相应稀释。 
表2列举了使用本试剂盒的不同Input DNA量推荐的针对Illumina^®测序平台的Adapter稀释方法。
表3列举了使用本试剂盒的不同Input DNA量推荐的针对MGI^®测序平台的Adapter稀释方法。
表4列举了使用本公司Hieff NGS^® Dual UMI UDB Adapter Kit for MGI^®，Set 1~Set 2 (Cat#13367~Cat#13368)的不同Input DNA量推荐的UMI Adapter稀释方法。
表2  100 pg-1 μg Input DNA针对Illumina^®测序平台推荐的Adapter使用浓度