- ￥980
- 炎熙生物/Biothrive
- PD-Cde-1000
- 中国
- 2026年05月05日
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- 详细信息
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- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
10000
- 英文名：
Detergent-Compatible Bradford Assay Kit
- 保质期：
一年
- 供应商：
上海炎熙生物科技有限公司
- 保存条件：
4度避光
- 规格：
1000毫升
去垢剂兼容型Bradford试剂盒
Detergent-Compatible Bradford Assay Kit
保存：4度避光，一年有效。-20度冷冻可长期保存。
货号：PD-Cde-1000
组分：1000毫升染色液一瓶，5 mg/ml BSA四支。
1. Bradford法的基本原理
Bradford法是一种基于考马斯亮蓝G-250染料与蛋白质结合后颜色变化的经典蛋白质定量方法。在酸性条件下，考马斯亮蓝G-250以单体形式存在，呈现红色（最大吸收峰约465 nm）；当与蛋白质的疏水区域结合后，染料聚合成蓝色复合物（最大吸收峰移至595 nm），吸光值与蛋白质浓度呈正相关。反应在5分钟内完成，无需加热或长时间孵育，可检测低至0.1–0.5 μg/mL的蛋白质。
2. 传统Bradford法的局限性
尽管Bradford法广泛使用，但其对某些实验条件敏感，尤其是去垢剂的存在会显著干扰检测结果，例如：
SDS等阴离子去垢剂：与染料竞争结合蛋白质，降低显色效率。
Triton X-100、NP-40等非离子去垢剂：可能引起溶液浑浊或光散射，导致吸光值异常。
高浓度去垢剂（如>1% SDS）：直接破坏染料-蛋白质复合物的稳定性。
结果偏差：传统Bradford试剂在含去垢剂的样品中，吸光值可能显著降低或不可预测。
3. 去垢剂兼容型Bradford试剂盒的技术改进
本试剂盒通过抗干扰配方设计，实现了对多种去垢剂的高耐受性。
支持595 nm和450 nm双波长检测，通过差值法消除背景干扰。
4. 技术优势
兼容多种去垢剂，包括：6% SDS、4% Tween20、2% Triton-X100、2% NP40、8% CHAPS，可耐受各种RIPA裂解液，对蛋白组学实验常用的各种缓冲液均可兼容。
应用场景：适用于细胞裂解液、组织匀浆液、病毒裂解液等含去垢剂的样本。
操作流程：仅需5分钟完成显色，支持96孔板检测，适配自动化工作站。
试剂稳定性：避光保存有效期长达12个月，可反复冻融。
5. 技术局限性
不适用于强还原环境：如含高浓度DTT（>1 mM）或β-巯基乙醇的样品可能干扰显色。
光散射干扰：若样品浑浊度极高（如未离心的细胞碎片），需离心后取上清检测。
染料稳定性：长期暴露于光照或高温可能导致试剂失效。
6. 总结
去垢剂兼容型Bradford试剂盒通过优化配方，解决了传统方法在含去垢剂样本中的检测难题，同时保持了快速、灵敏的核心优势，其技术改进使其成为蛋白质组学研究、生物制药及基础实验室中处理复杂样本的理想选择。
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文献和实验速度最好是选用 Bradford 法了。但是，Bradford 也存在一些问题，比如标准曲线线性相关性不佳，容易受 Triton，SDS 等去垢剂的影响等等。好在我们都是站在前人的肩膀上，前人早已开发出去垢剂兼容型的 Bradford 试剂，性能优于常规 Bradford 法，比 BCA 法更快更方便。今天我们讨论的方法就是基于去垢剂兼容型的 Bradford 试剂来快速蛋白定量。不知道上哪里买的同学可以在丁香通上找找。下图就是用 Bradford 法测出的标准曲线。虽然线性拟合不佳（R
度高，与一些还原剂(如DTT、巯基乙醇)兼容。但有些去垢剂、黄酮、碱性缓冲液会干扰测定。 DC (Detergent Compatible) 蛋白测定 是一种适用于含有去垢剂的蛋白样品比色测定方法。该方法类似于常规的Lowry 测定方法 (Lowry et al.1951)，但经过改良，节省了操作时间。DC 蛋白测定只需要15分钟的温育过程，而且吸光值读数能保持2小时的稳定。它可以兼容NaOH和多种去污剂，如10% SDS、2% NP-40、1% CHAPS、1% Triton X-100
目前常用比色法测定样品蛋白的含量：Bradford法（考马斯亮蓝法）、Lowry法（Folin-酚试剂法）、 BCA法等。但各有优缺点，大家可以根据具体情况选取。按相应蛋白质定量试剂盒操作说明操作，测定样品浓度。收集完蛋白样品后，为确保每个蛋白样品的上样量一致，需要测定每个蛋白样品的蛋白浓度。根据所使用的裂解液的不同，需要采用适当的蛋白浓度测定方法。因为不同的蛋白浓度测定方法对于一些去垢剂和还原剂等的兼容性差别很大，大家可以根据具体情况选取。Bradford法（考马斯亮蓝法）:考马斯亮蓝G
