超灵敏的Olink蛋白组学，助力精准医疗发展的“黑科技”

超灵敏的Olink蛋白组学，助力精准医疗发展的“黑科技”

 

• 项目简介

蛋白质组学是一门研究生物体在特定条件、特定时间、特定空间内全部蛋白质的种类、表达、相互作用、修饰状态的学科。传统的蛋白组学、蛋白标志物检测方法，在检测的通量、灵敏度、临床转化的能力上，有种种限制。

为了克服这些限制，经过多年的研发和充分验证，Olink Proteomics现在已经具备了成熟的技术方案：Olink蛋白质组学核心技术是邻位延伸分析技术（Proximity Extension Assay PEA），该技术具有高通量、高特异性、高灵敏度、宽动态范围等特点。表观生物推出Olink蛋白组学检测服务，实现超灵敏多重蛋白标志物检测、无偏靶向蛋白质组学和精准蛋白组学，以帮助蛋白标志物的发现、药物研发、转化医学、以及让“多组学整合”真正切实可行。

 

• 技术应用

1. 科学研究：蛋白质组学研究

2. 药物研发：已有多家全球拔尖药厂使用

3. 生物标志物研究：疾病早筛、诊断、预后等（液体活检）biomarker筛选

 

• 技术优势

1. 高通量：可快速检测批量样品中的48-3072种蛋白标志物

2. 低体积：每个样品仅需不到8微升（以血浆为例）

3. 靶向性：所有检测蛋白，均为生物标志物，覆盖100%信号通路

4. 高灵敏：检测灵敏度可达fg/ml级别

5. 宽动态：动态范围横跨10个log，覆盖高、中、低丰度蛋白

6. 自动化：自动化样品处理流程提供了最佳的简易性、准确性和重复性

7. 多组学：可通过一台NGS二代测序仪或qPCR仪得到多组学数据

 

• 技术原理

PEA技术针对每个待检测蛋白设计了一对抗体，该抗体分别偶联独有的DNA寡核苷酸链，形成具有高特异性的探针；抗体与待检测物结合后，临近的两条DNA链互补延伸，生成新的DNA分子模块；再经过PCR扩增，放大信号进行检测。通过不同的探针，可同时准确、快速检测上千种蛋白质。
 

 

96-plex PEA的技术流程图^[1]

 

（A）94对特异性抗体配上PEA探针，加入样本孵育

（B）探针对结合其特异性抗原，加入DNA聚合酶，使两个寡核苷酸的延伸和连接，并形成PCR模板。

（C）预扩增所有96个不同的DNA模板

（D）尿嘧啶DNA糖化酶部分消化DNA模板并去除所有未结合的引物

（E）每个单独的DNA序列都通过微流控qPCR使用特异性引物进行检测和定量

 

• 样品类型

1. 血浆、血清等体液，≥40ul/样本

2. 组织样本

3. 细胞样本

4. 外泌体样本

5. 其他样本类型，建议蛋白含量0.5mg/ml ~ 1mg/ml

 

• Olink Target系列介绍

疾病相关Panel

• OLINK精准蛋白质组学服务(心血管疾病-II PANEL)

• OLINK精准蛋白质组学服务(心血管疾病-III PANEL)

• OLINK精准蛋白质组学服务(肿瘤-II PANNEL)

• OLINK精准蛋白质组学服务(肿瘤-III PANNEL)

• OLINK精准蛋白质组学服务(神经 PANEL)

• OLINK精准蛋白质组学服务(炎症 PANEL)

• OLINK精准蛋白质组学服务(免疫-癌症 PANEL)

BP相关Panel

• OLINK精准蛋白质组学服务(心肌代谢 PANEL)

• OLINK精准蛋白质组学服务(细胞调控 PANEL)

• OLINK精准蛋白质组学服务(发育 PANEL)

• OLINK精准蛋白质组学服务(免疫应答 PANEL)

• OLINK精准蛋白质组学服务(代谢 PANEL)

• OLINK精准蛋白质组学服务(神经探索 PANEL)

• OLINK精准蛋白质组学服务(脏器损伤 PANEL)

参考文献

[1] Erika Assarsson, Martin Lundberg, Göran Holmquist, et al. Homogenous 96-plex PEA immunoassay exhibiting high sensitivity, specificity, and excellent scalability. PLoS One. 2014 Apr 22;9(4):e95192.
 

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