- ￥3200
- 爱必信(absin)
- 上海
- abs50022
- 2025年07月12日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保质期：
本产品应避光置于-20℃储存； 避免反复冻融。本产品在推荐条件下可以储存 12 个月。
- 保存条件：
本产品应避光置于-20℃储存； 避免反复冻融。本产品在推荐条件下可以储存 12 个月。
- 英文名：
TUNEL Apoptosis Detection Kit-DAB
- 库存：
现货
- 供应商：
爱必信(上海)生物科技有限公司
- 规格：
50T
| 描述 | 细胞凋亡的一个显著特点是细胞染色体 DNA 的降解，这是一个较普遍的现象。这种降解非常特异并有规律，所产生的不同长度的 DNA 片段约为 180 bp-200 bp的整数倍，表现为琼脂糖凝胶电泳中呈现特异的梯状Ladder图谱，本试剂盒采用 TUNEL 法，应用末端脱氧核糖核苷酸转移酶(TerminaL DeoxynucLeotidyL Transferase, TdT)在凋亡细胞断裂DNA 的3´-OH末端催化掺入生物素(Biotin)标记的dUTP(Biotin-X-dUTP)。随后和辣根过氧化物酶(HRP)标记的Streptavidin (Streptavidin-HRP)特异结合，最后在HRP的催化下通过DAB显色来显示凋亡细胞，从而可以通过普通光学显微镜观察并计数凋亡细胞。
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| 注意事项 | 1、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。 2、NaN对HRP有抑制作用，实验中请勿使用含有NaN的试剂。 |
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| 储存/保存方法 | 本产品应避光置于-20℃储存； TUNEL Reaction Buffer 避光储存于-20℃，避免反复冻融。本产品在推荐条件下可以储存 12 个月。 |
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文献和实验- Platycodin D sensitizes KRAS-mutant colorectal cancer cells to cetuximab by inhibiting the PI3K/Akt signaling pathwayYanfei Liu, Shifeng Tian, Ben Yi, Zhiqiang Feng, Tianhao Chu, Jun Liu, Chunze Zhang, Shiwu Zhang, Yijia Wang
Frontiers in Oncology. 2022 Oct 27 .
影响因子： 5.738
的细胞几乎没有DNA的断裂，因而没有3'-OH形成，很少能够被染色。由此，TUNEL成为了检测DNA片段化(细胞凋亡)的最常用方法。(以TUNEL法细胞凋亡检测试剂盒(增强型，绿色荧光)为例) TUNEL检测：使用20 U/ml Dnase处理Hela细胞10分钟。 二、TUNEL实验中关键步骤 1. 充分脱蜡和水化。脱蜡前可先将切片在 60ºC烤片 20 min，再使用二甲苯脱蜡2次，每次 5-10 min;而水化一般建议用梯度乙醇从高浓度到低浓度浸洗，便于后期试剂能充分、均匀的结合反应
亲和素与 dTUTP 上的 biotin 结合（每个链霉亲和素至少可以再结合 3 个 biotin 分子），最后用 DAB、过氧化氢与 SP 上的辣根过氧化物酶 HRP 发生氧化、环化反应，形成苯乙肼聚合物而呈现棕褐色，最终通过计数每张切片上不同视野中 TUNEL 阳性细胞的比例来判断细胞凋亡发生情况。（小编碎碎念：掌握原理是做好实验的先决条件，不少人还以为是抗体抗原反应呢） TUNEL 实验中关键步骤 1. 充分脱蜡和水化。脱蜡可以先 60ºC 20 min，再用使用二甲苯两次 5-10 min
Annexin V是一种钙离子依赖性磷脂结合蛋白，与磷脂酰丝氨酸PS有高度亲和力，可通过细胞外侧暴露的PS与凋亡早期细胞胞膜结合，将Annexin V标记上荧光染料利用流式细胞仪或荧光显微镜可检测细胞凋亡。 由于凋亡晚期或坏死细胞膜完整性丧失，细胞核染色液可进入细胞内染色细胞核，搭配Annexin V使用可将处于不同凋亡时期的细胞区分开。 A．悬浮细胞： 按照实验方案进行凋亡诱导，300 g离心5 min，弃上清，收集细胞，用PBS洗涤细胞一次，轻轻重悬浮细胞并计数。 取1~5 ×
