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爱必信(上海)生物科技有限公司
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产品描述: 产品名称:细胞培养皿(60mm) 描述: 概况和特点: 形式: φ60mm 包装: 10个/包;500个/箱(50包) 技术指标: PS(聚苯乙烯) 伽马射线灭菌 储存/保存方法: 室温,保质期3年。
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文献和实验,无阻碍。 酶消化法时要避免组织消化过度,需要每隔 20 min取出观察,无明显组织块后即结束消化;细胞团块越小,消化越快,1 mL 移液器可以吹打的组织块,约消化 30~60 min 即可完成;若组织难以剪切,也可以切成大小 1~2 mm3 左右大小,每 30 min 用 1 mL 的移液器吹打混匀一次,直至可以顺畅通过,约 1~2 小时可以充分消化。 研磨时为尽量减少细胞损伤,需要浸泡于培养基中研磨,避免干磨。
缓冲液(湿转)25 mM Tris 碱190 mM 甘氨酸20% 甲醇测定 pH,pH 应为约 8.3。必要时进行调节。对于大于 80 kDa 的蛋白质,我们推荐加入最终浓度为 0.1% 的 SDS。转膜缓冲液(半干转)48 mM Tris39 mM 甘氨酸20% 甲醇0.04% SDS封闭缓冲液5% 奶粉或 BSA(牛血清白蛋白)加入 TBST 缓冲液中。混匀并过滤。过滤失败可能导致出现「斑点」,其中微小的黑色颗粒会在显色过程中污染印迹。实验步骤一、样品裂解◇ 制备细胞培养物裂解物1. 将细胞培养皿置于
M199 + 35g NaHCO3 + 25mM Hepes + 5 mM glutamine + 50 ug/ml Gentamycin.1M Hepes: 119.1 g Hepes + 500 ml dH2 O.Media A: 1X HBSS (10X:50ml) + 10 mM Hepes (1M: 5 ml) + 5 mM EDTA (0.5M: 5ml) + 2.5 % FBS (12.5 ml) in 500 ml.Media B: RPMI1640 470 ml + Gent





