SP悬浮细胞质粒DNA转染试剂盒

一、产品简介: 

该产品是我们研发团队在贴壁细胞质粒DNA转染试剂的基础上进一步优化研发成功的专门用于悬浮细胞质粒DNA转染的试剂。它具有非常卓越的转染性能，可高效转染多种悬浮细胞，转染效率在悬浮细胞中可高达85%以上（巨噬细胞、EGFP质粒）。与目前市场上常见的脂质体转染试剂不同，它采用生物可降解材料配制，对细胞的毒性很低，转染后细胞死亡率不到10%。其使用也非常方便，先将转染试剂与质粒DNA混合，再将转染试剂-DNA复合物直接加入培养细胞中，血清不影响其转染效果，不必刻意添加或更换培养液，操作十分简便。
 

二、产品特点：

1、卓越的细胞转染性能：可高效转染多种悬浮细胞，转染效率可高达85%以上；

2、极低的细胞毒性：使用可降解生物材料，细胞毒性低，转染细胞死亡率不到10%，大大降低了因细胞毒性对实验结果的影响，实验结果更为客观；

3、操作简便，可用于含血清培养基培养细胞的转染，转染前后不需要更换培养液。

操作步骤 （以24 孔板转染为例）:

A、 细胞接种:

1、 转染前一天或者两天接种细胞，接种细胞量为4-7×10 ⁵ 个；

2、 确保转染时细胞比活度为90%以上，且生长状态良好；

3、 如果细胞在转染前一天铺板，转染时可以不用换液，如果细胞在转染前两天铺板，转染时最好换液。
 

B、 SP /DNA转染复合物制备(该步完成后应立即进行转染):

1、 在1.5 ml无菌离心管中加入50µl无血清培养基，再加入适量的转染试剂，见附表。用移液器轻轻混匀后在室温静置5分钟。

2、在1.5 ml无菌离心管中加入50µl无血清培养基，加入适量的溶液A，轻轻混匀，再加入适量的DNA，见附表。用移液器再次轻轻混匀后在室温静置5分钟。

3、 将DNA-培养基混合物滴加至 SP -培养基混合物中，用移液器轻轻混匀后在室温静置15~20分钟后，立即转染。注意：SP -培养基混合物和DNA-培养基混合物的混合次序非常重要，切勿颠倒。

注意：离心管最好使用聚丙烯离心管。
 

C、转染:

1、将拟转染细胞强烈振荡20-40秒，确保培养细胞分散成单细胞悬液，无细胞结团；

2、将步骤B制备的转染复合物滴加至培养基中，边加边轻轻晃动培养板。加完后，立即将培养板转入培养箱继续培养。

3、 培养24~96小时后收获。

4、 SP在完全培养基中仍有较高的转染效率，因此转染前后不需要换成无血清或低血清培养基。因收获蛋白需要，可以使用悬浮细胞培养专用的无血清培养基。