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- XY-PCR2987
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- 2025年07月15日
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上海烜雅生物科技有限公司
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产品规格：50次
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有效期：1年
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PCR技术，即聚合酶链反应（polymerase chain reaction，PCR）是由美国PE Cetus公司的Kary Mullis在1983年（1993年获诺贝尔化学奖）建立的。这项技术可在试管内的经数小时反应就将特定的DNA片段扩增数百万倍，这种迅速获取大量单一核酸片段的技术在分子生物学研究中具有举足轻重的意义，极大地推动了生命科学的研究进展。它不仅是DNA分析最常用的技术，而且在DNA重组与表达、基因结构分析和功能检测中具有重要的应用价值。
实验目的
1.掌握聚合酶链式反应的原理。
2. 掌握移液枪和PCR仪的基本操作技术。
含麸质谷物源性染料法荧光定量PCR试剂盒实验试剂与器材
模板DNA、2.5mmol/L dNTP
Taq DNA聚合酶（5U/μL）、SSR引物
10 ×buffer、15mmol/L Mg2+、ddH2O
PCR仪、移液枪、PCR板
含麸质谷物源性染料法荧光定量PCR试剂盒特点：
2.荧光定量PCR检测，比常规PCR更加灵敏。
3.快速，整个检测过程（按一个样品计）所需时间仅为2.0小时。
4.一管式闭管操作，降低了交叉污染。
5.提供阳性标准品，便于分析实验结果。
6.对混合样品中动物成分的检测下限为0.1%，对样品中动物成分的核酸检测下限为 1.0ng/µL。
7.本只能用于科研，足够50次20uL体系的荧光定量PCR。
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文献和实验一种用于肝素粗品质量监测的、检测原料药中反刍动物DNA的多重RT-PCR分析方法的开发
动物源污染的实时荧光定量PCR技术。该检测法由一套针对反刍动物（牛、绵羊、山羊）和猪的冻干引物、探针及扩增内标组成。该方法经过两处分析机构验证：第一个位于FDA，第二个位于某州独立实验室。肝素钠多重实时荧光定量PCR（hMRTA）检测方法性能通过了美国FDA兽药中心研发处制定的特异性、灵敏度和专一性严格验收标准。符合早前建立的饲料中反刍动物原料多重实时荧光定量PCR检测法的灵敏度和重复性要求。hMRTA法检测猪源肝素钠粗品，98%达灵敏度，真阳性98%、假阴性2%。PCR检测法检测三个反刍动物物种，可作
的接头区，这样可以更有效的不受基因组DNA污染的影响。 至于设计软件，PRIMER3，PRIMER5，PRIMER EXPRESS都应该可以的。做染料法最关键的就是寻找到合适的引物和做污染的预防工作。对于引物，你要有从一大堆引物中挑出一两个能用的引物的思想准备---寻找合适的引物非常不易。 五、cDNA与引物质量检测 取0.2 ml薄壁PCR管，编号。向各管中加入含染料2×PCR TaqMix10 ul；加入正反向引物各0.5 ul（引物浓度10 uM
是复制的负调节物，另外，由质粒编码的一种Rop/Rom蛋白可提高RNAI与RNAII结合的效率，增强RNAI的负调控作用，因此，Rop/Rom基因缺失至少可使colE1质粒拷贝数提高3至4倍[8]。Yavachev 和 Wang [9-10]研究报道非荷载的转移RNA的二氢尿嘧啶环、反义环和CCA序列可与RNA I或RNAII的环有高度的同源性，从而会影响到质粒DNA的复制，但是其具体机制还有待进一步的研究。 据Minton[11]报道，pUC19系列载体同样被缺失了rop基因，但其与其他缺失
