7.5% NaHCO₃溶液

小心翼翼还是养不好细胞？师兄说了一个让我惊呆的原因

NaHCO3 浓度的 Earle's 平衡盐溶液，并且由培养箱维持 5～10% CO2。通常，1.2～2.2g/L NaHCO3 配合 5% CO2，3.7 g/L NaHCO3 配合 10% CO2。精确的计量因培养基配方而不同。除了 Leibovitz's L-15 (ATCC No.30-2008)，ATCC 所有培养基都要匹配 5% CO2。绝大多数 ATCC 培养基含 1.5g/L NaHCO3 以及额外的丙酮酸钠。而 Gibco Hyclone 很多品牌的培养基里都含有 3.7 g/L

干粉培养基的配制

注意事项 1.认真阅读说明书。说明书都注明干粉不包含的成分，常见的有NaHCO3、谷氨酰胺、丙酮酸钠、HEPES等。这些成分有些是必须添加的，如NaHCO3、谷氨酰胺，有些根据实验需要决定。2.配制是要保证充分溶解，NaHCO3、谷氨酰胺等物质都要等培养基完全溶解之后才能添加。3.配制所用的水应是三蒸水，离子浓度很低。4.所用器皿应严格消毒。5.配制好的培养基应马上过滤，无菌保存于4度。6.液体培养基主要是为了科研工作的方便而设计的培养基，它是一种灭菌后保证无菌的溶液，必要时可制成无内毒素

细胞培养用液

区别是前者不含有Ca2+、Mg2+，因此D-Hank"s常用于配制胰酶溶液。Earle平衡液含有较高的NaHCO3(2.2g/L),适合于5%CO2的培养条件，Hank"s平衡液仅含有0.35g/L NaHCO3，不能用于5%CO2的环境，若放入CO2培养相，溶液将迅速变酸，使用时应注意。 配制溶液应使用双蒸水或去离子水。如果配方中含有Ca2+、Mg2+，应当首先溶解这些成分。配好的平衡盐溶液可以过滤除菌 或高温灭菌。 二、消化液:取材进行原代培养时常常需要将组织块消化解离形成细胞