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Qiagen 205311 反转录试剂盒

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  • 205311
  • 2025年08月13日
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      北京云肽生物科技有限公司

    Qiagen 205311 反转录试剂盒
    Qiagen 205311 反转录试剂盒产品简介:
    产品品牌:QIAGEN

    产品名称: 反转录试剂盒

    产品货号: 205311
    产品规格:50T/盒
    产品细节图片1

    Qiagen 205311 反转录试剂盒产品说明:
    用于快速cDNA合成,实现灵敏的实时两步RT-PCR用于基因表达分析
    • 仅需20分钟即可完成cDNA合成和gDNA去除
    • 即使从低丰度转录本中也能获得高cDNA
    • 从转录物的5'和3'区域合成cDNA
    • 无需设计RNA特异性引物或探针
    独特的QuantiTect Reverse Transcription Kit为基因组DNA去除提供了快速方便的cDNA合成方法。通过gDNA Wipeout Buffer有效消除RNA样品中的基因组DNA污染。快速有效逆转录所需的所有组分均随QuantiTect Reverse Transcription Kit提供,包括Quantiscript Reverse Transcriptase,Quantiscript RT Buffer和独特的RT Primer Mix。合成的cDNA被优化用于实时PCR,允许可靠地定量来自mRNA转录物的所有区域的靶标。
    性能
    使用QuantiTect Reverse Transcription Kit,使用独特的gDNA Wipeout Buffer有效快速地去除RNA样品中的基因组DNA(参见有效的基因组DNA去除,以获得准确的实时RT-PCR)。消除基因组DNA对于准确的基因表达结果至关重要,并且RNA特异性引物或探针的设计并不总是可行的。使用gDNA Wipeout Buffer可节省时间并降低成本,因为在RNA样品纯化期间或之后不需要单独的DNA酶消化。 
    Quantiscript Reverse Transcriptase的高RNA亲和力与Quantiscript RT Buffer结合,可以从任何RNA模板中获得高产量的cDNA(参见表格“较低cDNA转录物的cDNA产量”)。即使是困难的模板,例如具有高GC含量或复杂二级结构的模板,也能成功地进行逆转录。
    原理
    QuantiTect Reverse Transcriptase是Omniscript和Sensiscript Reverse Transcriptases的新型混合物,它对RNA具有高亲和力,能够从各种RNA量(10 pg至1μg)合成cDNA。与其他供应商的试剂盒相比,QuantiTect Reverse Transcription Kit提供高产量的cDNA模板用于实时PCR分析,无论扩增的目标区域位于转录本上的何处。即使是困难的模板,例如具有高GC含量或复杂二级结构的模板,也能成功地进行逆转录。QuantiTect RT Buffer也经过优化,可与实时PCR缓冲液兼容。
    为了在实时RT-PCR基因表达测定中获得准确的结果,重要的是仅扩增和检测cDNA。通过设计跨越外显子/外显子边界的引物或探针,可以避免基因组DNA的干扰。然而,在不可能的情况下(例如,cDNA来自单外显子基因),起始RNA样品必须不含基因组DNA。使用QuantiTect Reverse Transcription Kit,使用独特的gDNA Wipeout Buffer有效快速地去除RNA样品中的基因组DNA。由于在RNA样品纯化期间或之后不需要单独的DNA酶消化,因此节省了时间并降低了成本。而且,RNA特异性引物或探针的设计是不必要的。
    程序
    使用QuantiTect Reverse Transcription Kit,基因组DNA去除和cDNA合成仅需20分钟(参见“ 快速方便的cDNA合成 ” 流程图)。该过程快速且方便,因为两个反应均使用相同的孵育温度进行并且使用主混合物设置。
    QuantiTect Reverse Transcription Kit包含快速cDNA合成所需的一切。将纯化的RNA在gDNA Wipeout Buffer中简单孵育,以有效去除污染的基因组DNA。与其他方法相反,然后使用由Quantiscript Reverse Transcriptase,Quantiscript RT Buffer和RT Primer Mix制备的主混合物将RNA样品直接用于逆转录。使用Quantiscript Reverse Transcriptase,RNA可以在低温下转录,甚至通过复杂的2°结构转录,确保RNA保持完整 - 整个反应在42°C进行,然后在95°C下灭活。不需要RNA变性,引物退火和RNase H消化的额外步骤。
    应用
    QuantiTect Reverse Transcription Kit可为所有类型的起始材料提供高效灵敏的实时RT-PCR,包括激光显微切割样品和组织活检。

     温馨提示:不可用于临床治疗。
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    Qiagen

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      质粒DNA的提纯是基因工程实验中最常用的试验方法之一,质粒DNA提纯效率和质量与其后续实验步骤(如PCR扩增、酶切、连接、转化大肠杆菌和转染真核细胞等)的成功与否有着直接的关系,因此高效快速地从细菌细胞中提纯质粒DNA 具有重要的意义,本文主要介绍了由QIAGEN plasmid Midi试剂盒方法提取质粒的方法。1. Pick a single colony from a streak plate and inoculate 25 ml of LB with appropriate

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