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北京百奥创新科技有限公司
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详询
- 英文名:
LB Broth
- 规格:
250g
| 英文名称 | LB Broth |
| 级别 | BR |
| 别名 | lb培养基 |
| 纯度 | BR |
| 单位 | 瓶 |
| 储存条件 | RT |
| 有效期 | 3年 |
| 规格 | 250g |
产品用途:
用于分子生物学中大肠杆菌的培养;用于细菌增菌培养。
成分(g/L)
蛋白胨 10.0g
酵母粉 5.0g
氯化钠 5.0g
PH值 7.0±0.1
用 法:称取本品20克,溶解于1000ml蒸馏水中, 121℃高压灭菌15分钟备用。


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文献和实验沉淀加入750μl预冷的(4℃)75mmol/L CaCL2 溶液,轻轻吹打菌悬液,放冰浴30min。 5.4℃3000rpm/min,离心5min,弃上清。 6.菌体沉淀加入200微升预冷的75mmol/LCaCL2溶液,冰浴4min以上。4℃保存备用。 (二)质粒转化 【材料】 1.pBR322 质粒DNA, 2.感受态菌75mmol CaCl2 3.LB肉汤培养基,无药LB琼脂平板,氨苄青霉素琼脂平板(50ug/ml) 4.
感受态细胞的制备: 1, 把DH5菌种分别接种在含氨卞的LB平板和不含氨卞的LB平板上,培养16-18小时。结果在不含氨卞的LB平板上DH5菌长出单个菌落,而在含氨卞的LB平板上无可见菌落生成,证明DH5菌未被杂菌污染; 2, 挑取单个菌落接种于2ml不含氨卞的LB肉汤,37度,150rpm,,振荡培养过夜; 3, 取上述0.2ml菌液接种于30ml不含氨卞的LB肉汤,37度,150rpm,,振荡培养3小时,使其OD600=0.4; 4, 将上述培养物转入40ml离心管,冰浴10
6) 菌体沉淀加入200微升预冷的75mmol/LCaCl2 溶液,冰浴4min以上。4℃保存备用。 2. 质粒转化 1) 取2个洁净,灭菌的EP管,加入各成分。 2) 上述2个试管充分混均匀后,置冰浴30min。 3) 42℃2min或37℃5min,立即置冰浴2min。 4) 加入1ml LB肉汤培养基,37℃静止培养1h。 3. 转化子筛选 1) 取实验组培养菌液涂布在氨苄青霉素琼脂平板(50ug/ml
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