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CTLL-2小鼠T淋巴细胞丨C
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小鼠源细胞株
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淋巴母细胞样
IMMOCELL
9999
CTLL-2细胞株
悬浮生长
顺丰快递
小鼠
T 细胞
CTLL-2小鼠T淋巴细胞
产品基本信息
细胞名称:CTLL-2小鼠T淋巴细胞
组织来源:T 细胞
形态:淋巴母细胞样
生长特性:悬浮生长
培养基::RPMI-1640+10% FBS+100IU/ml IL2或mouseIL2+1% P/S
生长条件:气相:95%空气+5%二氧化碳;温度:37℃
传代方法:1:2至1:3,每周 2-3次
冻存条件:无血清冻存液,液氮储存
支原体检测:无
细胞培养操作
1)复苏细胞:将含有1 mL细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加4 mL 20%FBS含200IU IL2的培养基混合均匀。在1000 rpm条件下离心3-5 min,弃去上清液,加1-2 mL培养基后轻轻吹匀。然后将所有细胞悬液加入含适量培养基的培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入6 cm皿中,加入约4 mL培养基,培养过夜)。第二天换液(培养基补足到10ml,加入100IU IL2)并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
收集细胞,1000RPM条件下离心3-5min分钟,弃去上清液,补加1-2ml培养液后吹匀,将细胞悬液按0.02M/ml的密度分到含新培养基的新皿中或者瓶中。
在IL2充分的情况下,细胞生长旺盛,隔天细胞数翻10倍以上,需及时传代,密度超过0.5M/ml,24H后细胞大量死亡。
3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为例;
a、收集细胞及细胞培养液,装入无菌离心管中,1000 rpm条件下离心4 min,弃去上清液,用PBS清洗一遍,弃尽PBS,进行细胞计数。
b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液,使细胞密度5×106~1×107/mL,轻轻混匀,每支冻存管冻存1mL细胞悬液,注意冻存管做好标识。
c、将冻存管放入-80℃冰箱,24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
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223 人阅读发布时间:2021-05-14 09:41
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