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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 品系:
人源细胞株
- 细胞类型:
成纤维细胞样
- 肿瘤类型:
详询
- 供应商:
IMMOCELL
- 库存:
9999
- 英文名:
93T449
- 生长状态:
贴壁生长
- 年限:
详询
- 运输方式:
顺丰快递
- 器官来源:
人
- 是否是肿瘤细胞:
详询
- 细胞形态:
成纤维细胞样
- 免疫类型:
详询
- 物种来源:
人源细胞株
- 相关疾病:
详询
- 组织来源:
脂肪肉瘤
93T449人高分化脂肪肉瘤细胞
产品基本信息
细胞名称:93T449人高分化脂肪肉瘤细胞
组织来源:脂肪肉瘤
培养基::RPMI-1640+10%FBS+1%P/S
生长条件:气相:95%空气+5%二氧化碳;温度:37℃
传代方法:1:3-1:6,每2-3天换液一次
冻存条件:无血清冻存液,液氮储存
支原体检测:无
细胞培养操作
1)复苏细胞:将含有1 mL细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加4 mL培养基混合均匀。在1000 rpm条件下离心3 min,弃去上清液,加1-2 mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入含适量培养基的培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10 cm皿中,加入约8 mL培养基,培养过夜)。第三天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
a、弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
b、加1 mL消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,使消化液浸润所有细胞,将培养瓶置于37℃培养箱中消化1-2 min(视细胞情况而定),然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加2-3ml完全培养基终止消化。轻轻打匀后装入无菌离心管中,1000 rpm离心5 min,弃去上清液,补加1-2 mL培养液后吹匀。
c、将细胞悬液按1:2比例分到新的含8 mL培养基的新皿中或者瓶中,置于培养箱中培养。
3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为例;
a、收集细胞及细胞培养液,装入无菌离心管中,1000 rpm条件下离心4 min,弃去上清液,用PBS清洗一遍,弃尽PBS,进行细胞计数。
b、根据细胞数量加入无血清细胞冻存液,使细胞密度5x106~1x107/mL,轻轻混匀,每支冻存管冻存1mL细胞悬液,注意冻存管做好标识。
c、将冻存管放入-80℃冰箱,24 h后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。




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