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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
上海逍鹏生物科技有限公司
- 库存:
充足
- 英文名:
Trypsin EDTA Solution C (0.05%), EDTA (0.02%)
- 规格:
100ml,500ml
【产品介绍】
胰蛋白酶是一种动物源性产品,是培养细胞过程中最常用的酶,胰蛋白酶是一种胰丝氨酸肽链内切酶,作用于多肽链中赖氨酸和精氨酸残基中的羧基侧。胰蛋白酶溶液作为细胞分离试剂广泛应用于贴壁细胞的连续培养。胰蛋白酶水解或胰蛋白酶化是蛋白质被胰蛋白酶消化或处理的过程,因此被称为胰蛋白酶化。
大多数细胞在体外培养时生长为附着在基质上的单层细胞层。当进行贴壁细胞传代时,这些细胞间及细胞与基质之间的连接必须分离。蛋白水解酶,如胰蛋白酶(即丝氨酸肽酶),通过打破特定氨基酸之间的肽键,分离细胞与细胞基质,实现细胞的传代培养。EDTA是一种二价金属离子螯合剂,用于结合抑制胰蛋白酶活性的钙离子和镁离子。
【适用范围】
适用于贴壁疏松细胞的消化传代;也可用于组织细胞分离的初步消化。本产品消化能力较温和,常用于容易消化、比较脆弱的细胞,如大鼠肺泡二型上皮细胞等。
【使用方法】
1. 以T25培养瓶为例,细胞传代时,先将培养瓶中的培养基吸弃,加入3ml PBS或DPBS冲洗细胞,吸弃。
2. 加入1ml 胰酶消化液,浸润整个底面,放入37℃培养箱中消化3-5min,取出后,用3ml完全培养基中和,然后300-400xg 离心3min。吸弃上清液。
3. 加完全培养基重悬细胞,按照所需量进行传代。
【储存条件及保质期】
应贮存在-10~-20℃,有效期为18个月。开封后存放4℃,注意避光,1周内使用。不建议反复冻融。
【注意事项】
1. 本品仅用于科研,不用于临床诊断和治疗,严禁内服,不能用嘴吸液。
2. 试剂包装如有破损或滴漏,严禁使用。
3. 操作过程应避免污染。
4. 操作人员万一与皮肤、粘膜接触,请立即用自来水冲洗。
5. 禁止使用超出规定有效期的产品。
【声明】
仅用于科研使用,不能用于临床诊断和治疗。
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文献和实验不要太懒哦 请教各位高手,如果在细胞的消化传代过程中,我想以EDTA替代胰酶对细胞进行消化的话,EDTA的配方???浓度??多谢!! 佳杰宝贝 EDTA可以代替胰酶吗? 黑糊糊2000 EDTA 不能代替trypsin,EDTA是螯合剂结合钙离子的,钙离子可以抑制胰酶的作用,所以采用胰酶和EDTA一起来作用,当然EDTA 因为对螯合细胞结构之间的钙离子的作用,所以对细胞有一定程度的离散作用
适用于,无师兄、师姐、非细心、单独开展细胞培养的实验者 对一般细胞 0.25% 胰酶(胰蛋白酶,Trypsin) 配方:100ml PBS,0.25g胰酶 步骤:1先配100mlPBS(1000mlPBS:8.0gNaCl,3.4785gPO4HNa2・12H2O /2.9gPO4HNa2 ,0.2gKCl,0.2gPO4H2K溶于1000ml蒸馏水) 2 称胰酶0.25g 3 加入PBS中,低速搅拌 〈4h冰浴中,或者4℃过夜 低速搅拌0.5h冰浴中
问:请问哪位仁兄能告知一下EDTA-胰蛋白酶的配制。急用!多谢!答:1、胰酶是0.25%,这是质量体积比,就是说0.25g胰酶溶于100ml PBS,注意,尽量不要用水来溶,因为要保持渗透压。2、EDTA的工作液溶度是0.02%-0.1%,根据细胞消化的难易程度自己调整。EDTA并不是必须的,容易消化的细胞可不加。EDTA对细胞贴壁性有影响,因此使用时要甚重。如果影响贴壁,但消化时必须要用,那么在用完全培养基终止消化后,可离心弃上清,再加完全培养基培养,可去除EDTA。如果对贴壁没
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