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- 2025年07月14日
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- 文献和实验
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- 英文名：
Gea 857;Gea-857;Gea 857;Gea857
- 库存：
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- 供应商：
无锡云萃生物
- CAS号：
120493-42-7
- 规格：
100mg
云萃
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文献和实验温度诱导型原核表达载体pBV220工作原理及全序列 实验原理 PLPR启动子是大肠杆菌l噬菌体中控制早期转录的启动子，具有极强的起始RNA转录的功能，基因工程中常用它来构建高效表达载体，它受抑制物CI蛋白的负调控。在实际中CI蛋白被改造成温度敏感型(CIts)，由DNA片段CIts857（857bp长）编码。CIts在30℃时具有抑制启动子的活性，在42℃时失活而失去抑制启动子的活性，因此，改变工程菌的培养温度即可控制目的基因的表达，这一点比用诱导剂诱导表达的系统要节省操作步骤和成本
造成温度敏感型(CIts)，由DNA片段CIts857（857bp长）编码。CIts在30℃时具有抑制启动子的活性，在42℃时失活而失去抑制启动子的活性，因此，改变工程菌的培养温度即可控制目的基因的表达，这一点比用诱导剂诱导表达的系统要节省操作步骤和成本，在大规模基因表达中优点尤其明显。有些表达载体本身带有CIts857片段，能自身编码CIts蛋白，对宿主的选择范围较宽；另一些表达载体自身不带CIts857片段，选择宿主茵时，要求宿主是有缺陷的原噬菌体溶源化的菌株（如M5219)，前一类载体
含缺陷性原噬菌体，编码 cIts857 和 N 蛋白。 cIts857 强烈抑制基因转录。 N基因可使 RNA polymerase 跨过基因内部潜在终止位点。 一般采用 42-45 ℃灭活 cIts857 阻遏物，此处采用 40℃ 以减少热激蛋白的诱导并使细菌能继续生长。因为温度转换不仅可诱导 PL/PR 启动子，也可诱导热激基因，而后者有些可编码蛋白酶。 1.2 表达 GST 融合蛋白的表达载体 GST 表达载体在启动子 tac 和多克隆位点之间加入
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