磷酸丙糖异构酶(TPI)测试盒_分光光度法(稳定高效灵敏)

中文名称：磷酸丙糖异构酶(TPI)测试盒
测定方法：分光光度法
测定规格：50管/48样
保存条件：低温避光保存

测定意义：
植物叶绿体中磷酸丙糖异构酶是光合作用中参与calvin循环的重要酶。作用于磷酸甘油醛和磷酸二羟酮之间的转化，磷酸二羟酮能快速透过叶绿体的包膜进入细胞质，并在其中逐步转化为蔗糖。



测定原理：
磷酸丙糖异构酶将磷酸二羟酮转化为3-磷酸甘油醛，3-磷酸甘油醛与NAD在3-磷酸甘油醛脱氢酶的作用下生成3-磷酸甘油酸和NADH，340nm处的吸光度变化反映了磷酸丙糖异构酶的活性的高低。

自备实验用品及仪器：
天平、低温离心机、研钵、震荡仪、紫外分光光度计、1 mL石英比色皿。

酶液提取：
①总TPI酶提取：建议称取约0.1g样本，加入1mL提取液一，冰浴匀浆后超声破碎（冰浴，200W，破碎3s，间歇7s，总时间1min），然后4℃，8000g离心10min，取上清测定。
②胞浆和叶绿体TPI酶的分离：按照植物组织质量（g）：提取液体积(mL)为1：5～10的比例（建议称取约0.1g样本，加入1mL提取液一），冰浴匀浆后于4℃，200g离心5min，弃沉淀，取上清在4℃，8000g离心10min，取上清用于测定胞浆TPI酶活性，取沉淀加1mL提取液二，震荡溶解后超声破碎（冰浴，200W，破碎3s，间歇7s，总时间1min），然后4℃，8000g离心10min，取上清测定叶绿体中TPI酶活性。
建议测定总TPI酶活性，按照步骤①提取粗酶液，若需要分别测定胞浆和叶绿体中的TPI，则按照步骤②提取粗酶液。

注   意 ：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。