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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
低温保存
- 保质期:
6个月
- 英文名:
Trypsin含量测试盒
- 库存:
259
- 供应商:
江西江蓝纯生物有限公司
- 规格:
100T/96S
测定方法:微量法
测定规格:100T/96S
保存条件:低温避光保存
测定意义:
胰蛋白酶选择性水解变性蛋白质中由赖氨酸或精氨酸的羧基所构成的肽链,是一种重要的消化酶。此外,胰蛋白酶还广泛应用于脓胸、血胸、外科炎症、溃疡、创伤性损伤等所产生的局部水肿、血肿及脓肿等的辅助治疗。
测定原理:
胰蛋白酶催化水解TAME的酯键,释放出的游离羧基与反应体系中的化钠发生中和反应,导致溶液的pH值降低,以苯酚红为指示剂,测定溶液在555nm处吸收值的变化,可以快速测得胰蛋白酶活性数据。胰蛋白酶在一定范围内与555nm处吸收值的降低呈良的线性关系。
自备仪器和用品:
酶标仪、96孔板、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、研钵、冰和蒸馏水。
测定步骤:
1. 酶标仪预热30 min,调节波长到555 nm。
2. 工作液的配制:临用前根据用量按照试剂一(V):试剂二(V):蒸馏水(V):试剂三(V)=1 mL:1 mL:5.4 mL:0.4 mL的比例充分混合。(注意:现用现配,用多少配多少,在空瓶中配制,试剂盒中带有4个空瓶)
3. 吸取5μL样本,加入195 μL工作液,混匀后立即测定,记录555nm下1min时的吸光值A1和2min时的吸光值A2。计算△A=A1-A2
注意:如果△A小于0.005,可将反应时间延长到5min。如果△A大于0.5,体系迅速变色,可将样本用提取液稀释后测定(建议稀释10倍),计算公式中乘以相应稀释倍数。
注 意:正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
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文献和实验胰蛋白酶 trypsin 为蛋白酶的一种, EC3.4.21.4。在脊椎动物中,作为消化酶而起作用。在胰脏是作为酶的前体胰蛋白酶原而被合成的。作为胰液的成分而分泌,受肠激酶,或胰蛋白酶的限制分解成为活化胰蛋白酶,是肽链内切酶,它能把多肽链中赖氨酸和精氨酸残基中的羧基侧切断。它不仅起消化酶的作用,而且还能限制分解糜蛋白酶原、羧肽酶原、磷脂酶原等其它酶的前体,起活化作用。是特异性最强的蛋白酶,在决定蛋白质的氨基酸排列中,它成为不可缺少的工具。牛的胰蛋白酶氨基酸残基 223个,分子
胰蛋白酶抑制剂 trypsin inhibitor 由生物产生,为与胰蛋白酶结合具有抑制该酶作用的物质。最初在胰脏中发现,但多数发现于血浆、豆科植物的种子、鸟类的卵等。认为动物的胰蛋白酶抑制剂的作用是调节胰蛋白酶的活性,但植物中的这种物质,其存在的意义还不清楚。它和胰蛋白酶形成 1∶ 1复合体,覆盖着活性部位起抑制作用。一般其结合力相当强,特异性也高,但有的对胰糜蛋白酶等其它蛋白酶也起抑制作用。上述列举的是低分子蛋白质,但最近从放线菌中发现一种新类型的物质,称为白肽
问:大家好,我要做牛胰蛋白酶的表达,但是还没有找到相关的文献,有谁知道他的序列,是223个氨基酸残基。现在这谢谢大家了!答:看看是不是这个!LOCUS NM_001113727 879 bp mRNA linear MAM 22-JAN-2008DEFINITION Bos taurus cationic trypsin (LOC780933), mRNA.ACCESSION NM_001113727 XM_584594VERSION NM_001113727.1 GI:165973957










