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线粒体柠檬酸(MCA)检测试剂盒_江蓝纯生物供应(微量法)

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  • ¥5405
  • 江蓝纯生物
  • 国内
  • JLC-G7496
  • 2025年07月10日
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    • 保存条件

      低温保存

    • 保质期

      6个月

    • 英文名

      MCA含量测试盒

    • 库存

      236

    • 供应商

      江西江蓝纯生物有限公司

    • 规格

      100管/96样

    中文名称:线粒体柠檬酸(MCA)检测试剂盒
    测定方法:微量法
    测定规格:100管/96样
    保存条件:低温避光保存

    测定意义:
    MCA是线粒体三羧酸循环的个中间产物,由柠檬酸合酶催化乙酰CoA与草酰乙酸合成,其含量是三羧酸循环强度的主要指标之一。
    配合测定酮酸含量、酮酸脱氢酶活性、乙酰CoA含量、柠檬酸合酶活性和MCA含量,其中(1)酮酸含量和酸脱氢酶活性变化可以反映糖酵解进行程度,(2)综合分析含量、酮酸脱氢酶活性和乙酰CoA含量变化可以反映脂肪酸β-氧化途径提供的乙酰CoA情况,(3)乙酰CoA含量、柠檬酸合酶活性和MCA含量变化可以反映三羧酸循环进行状况。

    产品细节图片1

    测定原理:
    MCA在柠檬酸裂解酶的作用下,生成α-酮酸(草酰乙酸);在弱酸性条件下,α-酮酸进一步与肼反应,生成相应的α-酮酸苯腙;α-酮酸苯腙在330nm处有吸收峰,该波长下吸光度的变化程度可反映出MCA的含量。

    自备仪器和用品:
    分光光度计/酶标仪、水浴锅、可调式移液枪、微量石英比色皿/96孔板(UV板)、研钵、蒸馏水。

    线粒体中柠檬酸提取:
    称0.05~0.1g样品(建议称0.1g样本),加入0.5mL酸性提取液,冰上充分研磨,600g/min 4℃离心5min;取上清至另一EP管中,11000g/min 4℃离心10min,弃上清(取300μL该上清液和300μL碱性提取液中和后可用于细胞质CA含量测定);沉淀即线粒体,向沉淀中加入0.5mL酸性提取液,充分悬浮溶解,超声波破碎(功率20%,超声3秒,间隔10秒,重复30次),取此溶液300μL和300μL碱性提取液中和,混匀,置冰上待测(不可用于蛋白质含量测定)。

    注   意 :正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定

    产品细节图片2

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