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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
低温保存
- 保质期:
6个月
- 英文名:
GS含量测试盒
- 库存:
204
- 供应商:
江西江蓝纯生物有限公司
- 规格:
100管/48样
测定方法:微量法
测定规格:100管/48样
保存条件:低温避光保存
测定意义:
GS(EC 6.3.1.2)主要存在于植物中,是生物体内氨同化的关键酶之一,催化铵离子和谷氨酸合成谷氨酰胺,不仅可以防止过多的铵离子对生物有毒性,而且谷氨酰胺也是氨的主要储存和运输形式。
测定原理:
GS在ATP和Mg2+存在下,催化铵离子和谷氨酸合成谷氨酰胺;谷氨酰胺进一步转化为γ─谷氨酰基异羟肟酸,在酸性条件下与铁形成的络合物在540nm处有大吸收峰,可用分光光度计测定。
所需的仪器和用品:
可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。
样本测定的准备:
1、细菌、细胞或组织样品的制备:
细菌或培养细胞:先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞数量(104个):提取液体积(mL)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1mL提取液),超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次);8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。
组织:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL提取液),进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min,取上清,置冰上待测。
2、血清(浆)样品:直接检测。
注 意:正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
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文献和实验编码的序列转录为mRNA,从而获得抗性产物氨基糖苷磷酸转移酶的高效表达,使细胞获得抗性而能在含有G418的选择性培养基中生长。neo基因为非扩增性选择基因,不影响目的基因拷贝数。G418筛选系统已在基因转移、基因敲除、抗性筛选以及转基因动物等方面得以广泛应用,与之作用原理相似的还有潮霉素和嘌呤霉素筛选系统。 而在生物医药领域中主要是利用CHO细胞的GS或DHFR 筛选系统进行抗体药物、重组蛋白等的生产。 CHO表达系统 CHO表达系统是目前应用最广泛的真核表达系统之一,与其他表达系统相比
表达,如扩增标志基因谷氨酰胺合成酶GS,可被MSX(L-methionine sulphosimine)所抑制,GS显性选择标志可在多种类型细胞中表达,通过大剂量一次性筛选,可获得高拷贝扩增。扩增标志基因可分别位于重、轻链载体上,通过共转染来获得抗体,也可将重、轻链串联于一个表达载体上,此时基因顺序很重要,因为下游启动子可被上游启动子通读而产生闭合现象。 2.大肠杆菌中表达 大肠杆菌虽没有糖基化修饰的功能,但是,现在已经证实表达的抗体片段如Fab、ScFv、VH能正确折叠及装配成具有
氏细胞,后者可能是来源于神经周膜和神经内膜细胞。大部分神经源性肉瘤含有S―100蛋白,显示来自于雪旺氏细胞。这些肿瘤对S―100蛋白的反应一般比良性者弱,而且,在高度间变的肿瘤,由于瘤细胞的反向分化,常丧失合成S―100蛋白的能力。 在神经肿瘤诊断和研究中,除上述三种常用标记物外,还有一些标记物可供选择或配合应用:①谷氨酰胺合成酶(glutamine synthetase, GS),其组织中分布与GFAP相同;②髓鞘碱性蛋白(myelin basic protein, MBP),用于少枝胶质











