- ￥632
- 江蓝纯生物
- 国内
- JLC-G7383
- 2025年07月11日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
低温保存
- 保质期：
6个月
- 英文名：
NAD-MDH含量测试盒
- 库存：
123
- 供应商：
江西江蓝纯生物有限公司
- 规格：
100管/96样
测定方法：微量法
测定规格：100管/96样
保存条件：低温避光保存
测定意义：
MDH （EC 1.1.1.37）广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，线粒体中 MDH 是 TCA 循环的关键酶之一，催化苹果酸形成草酰乙酸；相反，胞浆中 MDH 催化草酰乙酸形成苹果酸。草酰乙酸是重要的中间产物， 连接多条重要的代谢途径。因此，MDH 在细胞多种生理活动中扮演着重要的角色，包括线粒体的能量代谢、 苹果酸-天冬氨酸穿梭系统、活性氧代谢和抗病性等。根据不同的辅酶特异性，MDH 分为 NAD-依赖的 MDH 和 NADP-依赖的MDH，细菌中通常只含有 NAD-MDH，在真核细胞中，NAD-MDH 分布于细胞质和线粒体中。
测定原理：
NAD-MDH 催化 NADH 还原草酰乙酸生成苹果酸，导致 340nm 处光吸收下降。
需自备的仪器和用品：
紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96 孔板和蒸馏水。
测定步骤：
1、 分光光度计或酶标仪预热 30min 以上，调节波长至 340nm，蒸馏水调零。
2、检测工作液的配制：用时在试剂三中加入 19mL 试剂二和 0.5mL 蒸馏水，充分混匀待用；
用不完的试剂分装后-20℃保存，禁止反复冻融。；
3、测定前将检测工作液在 37℃（哺乳动物）或 25℃（其它物种）水浴 10min 以上。
4、在微量石英比色皿或 96 孔板中加入 5μL 样本和 195μL 工作液，混匀后立即记录 340nm
处20s 时的吸光值 A1 和 1min20s 后的吸光值 A2，计算 ΔA=A1-A2。
注 意：正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定
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文献和实验系催化水解 NAD 的烟酰胺和核糖的糖苷键的酶，可生成烟酰胺和 ADP核糖， EC3． 2． 2． 5。存在于动物的脑、脾脏、链孢霉、细菌的这种酶亦作用于 NADP 和脱氨 NAD ，存在于红血球的酶仅作用于 NAD ，此酶可被烟酰胺抑制。
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