- ￥210
- 翌圣生物（Yeasen）
- 11377ES24
- 上海
- 2026年01月31日
企业认证
相关产品推荐更多 >
万千商家帮你免费找货
0 人在求购买到急需产品
- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
大量现货
- 英文名：
2 × Frag/Prime Buffer
- 保质期：
有效期1年
- 供应商：
翌圣生物科技（上海）股份有限公司
- 保存条件：
-20度
- 规格：
24T
产品信息
| 产品名称 |
产品编号 |
规格 |
价格 |
| 2 × Frag/Prime Buffer |
11377ES24 |
24 T |
232 |
| 11377ES96 |
96 T |
632 |
产品描述
本产品衔接Hieff NGS® Dual-mode RNA Library Prep Kit (Yeasen: Cat#12309)，替代其中的Frag/Prime buffer使用，用于RNA的片段化和一链cDNA合成步骤。Input RNA可以是total RNA，也可以是mRNA纯化的产物、rRNA去除的产物等。由于在Cat#12309中直接使用1×Frag/Prime Buffer去洗脱mRNA纯化或rRNA去除操作中所得的RNA，没有额外的体积用于添加含RNA的溶液。若Input RNA已经溶解于Nuclease free ddH2O中，可选择本产品进行RNA片段化或一链cDNA合成反应。
产品组分
| 组分编号 |
组分名称 |
8 T |
24 T |
96 T |
| 11377-A |
2 × Frag/Prime Buffer |
68 μL |
204 μL |
816 μL |
运输与保存方法
干冰运输。-20 °C存放，有效期一年。
注意事项
1. 请使用无RNase污染的耗材，并对实验区域定期进行清理，推荐使用Thermo Fisher公司的RNAZapTM 高效核酸去除喷雾去除RNA酶污染。
2. Input RNA请溶于Nuclease free ddH2O，避免Mg2+的存在干扰片段化效果；Input RNA最大投入体积为8.5 μL，在进行洗脱时请注意洗脱体积的选择。
3. 本产品仅作科研用途！为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作。
使用方法
当Input RNA不需要片段化处理时，请选择方案A；当Input RNA需要片段化处理时，请选择方案B。
A1. 若Input RNA无需片段化处理，可结合Cat#12309试剂，按照表1直接配制第一链cDNA合成反应体系。
表1 直接进行第一链cDNA合成反应体系
| 名称 |
体积 (μL) |
| Input RNA |
8.5 |
| 2×Frag/Prime Buffer |
8.5 |
| Strand Specificity Reagent |
6 |
| 1st Strand Enzyme Mix |
2 |
| Total |
25 |
A2. 使用移液器轻轻吹打混匀，瞬离将反应液离心至管底，按照表2反应程序于PCR仪中进行一链合成反应。一链合成产物可衔接Cat#12309进行后续反应。
表2 第一链cDNA合成反应程序
| 温度 |
时间 |
| 热盖 105 °C |
On |
| 25 °C |
10 min |
| 42 °C |
15 min |
| 70 °C |
15 min |
| 4 °C |
Hold |
B1. 若Input RNA需要进行片段化处理，可按照3配制片段化体系进行RNA片段化。
表3 片段化反应体系
| 名称 |
体积 (μL) |
| Input RNA |
8.5 |
| 2×Frag/Prime Buffer |
8.5 |
| Total |
17 |
B2. 使用移液器轻轻吹打混匀，瞬离将反应液离心至管底，根据Input RNA的完整度和实验目的，参考Cat#12309说明书设置合适的片段化条件。
B3. 片段化产物进行一链cDNA合成，按照表4配制一链cDNA合成反应体系。
表4 第一链cDNA合成反应体系
| 名称 |
体积 (μL) |
| Fragmented RNA |
17 |
| Strand Specificity Reagent |
6 |
| 1st Strand Enzyme Mix |
2 |
| Total |
25 |
B4. 使用移液器轻轻吹打混匀，瞬离将反应液离心至管底，按照表2反应程序于PCR仪中进行一链合成反应。一链合成产物可衔接Cat#12309进行后续反应。
HB220803
风险提示：丁香通仅作为第三方平台，为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全，合理判断，谨慎选购商品，商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品，请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。
文献和实验稳定。另外，长度大于4kb的转录本对于痕量RNase的降解比小转录本更敏感。 为了增加贮存RNA样品的稳定性，可以将RNA溶解在去离子的甲酰胺中，存于-70℃。用于保存RNA的甲酰胺一定不能含有降解RNA的杂物。来源于胰脏的RNA至少可以在甲酰胺中保存一年。当准备使用RNA时，可以使用下列方法沉淀RNA：加入NaCl至0.2M及4倍体积的乙醇，室温放置3-5分钟，10,000×g离心5分钟。 在逆转录反应中经常加入RNase抑制剂以增加cDNA合成的长度和产量。RNase抑制剂要在第一链合成反应中
M-MLV第一链cDNA合成试剂盒-技术手册一、 试剂盒组成 Components SK2027 SK2028 5×M-MLV Reaction Buffer 100µl
冰上5min; 4. 稍微离心一下,顺序加入以下试剂: 4ul 5×first strand buffer 2ul 0.1M DTT 1ul 10mM dNTP(自己配制) 5. 混匀，稍微离心反应物之后,42℃放置2分钟; 6. 反应完成,趁热加入1 ul Superscipt II—RT,混匀; 7. 42℃反应50分钟,然后70℃,15分钟灭活反转录酶. 2. cDNA第二链的合成 1. 第一链
