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- JCsw_1193
- 2025年07月10日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
低温保存
- 保质期：
6个月
- 英文名：
非蛋白质巯基含量测试盒
- 库存：
183
- 供应商：
上海机纯实业有限公司
- 规格：
100T/48S
注 意 ：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
测定意义：
生物体内巯基主要包括非蛋白质巯基和蛋白质巯基。巯基化合物在体内具有重要的解毒功能，对生物体的自我调节具有非常重要的生理意义。
自备实验用品：
天平、研钵、恒温水浴锅、酶标仪、96孔板、乙醇和蒸馏水。
试剂组成和配制：
提取液：液体100 mL×1瓶，4℃保存。
试剂一：液体18 mL×1瓶，4℃保存。
试剂二：液体1mL×1管，4℃避光保存。
样品的制备：
1.按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL提取液）进行冰浴匀浆，然后8000g，4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
2.血清，培养液：取0.1mL样本，加入0.4mL提取液，混匀，室温静置10min, 然后8000g，4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
计算公式：
非蛋白巯基标准曲线：y = 1.8111x - 0.0037，R2 = 1，x为标品浓度，单位μmol/mL，y为吸光度ΔA。
1. 组织：
（1）按样本重量计算
非蛋白巯基含量（μmol/g 鲜重）=（ΔA+0.0037）÷1.8111×V样总÷W=0.552×（ΔA+0.0037）÷W
（2）按样本蛋白浓度计算
非蛋白巯基含量（μmol/mg prot）=（ΔA+0.0037）÷1.8111×V样总÷Cpr=0.552×（ΔA+0.0037）÷Cpr
2. 血清、培养液：
非蛋白巯基含量（μmol/L）=（ΔA+0.0037）÷1.8111×5×103=2761×（ΔA+0.0037）V样总：加入提取液体积，1mL；W：样品质量，g ；Cpr：样本蛋白浓度，mg/mL；5：血清，培养液等液体样本稀释倍数；103 ：1mmol/ L=103μmol/ L
注意事项：
低检出限为10μmol/L。
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文献和实验用凯氏法测定蛋白质的含氮量相当恒定（约14%一18%），平均含量约为16%。因此，蛋白质氮乘以6.25%即为蛋白质含量。如果实验需要时，也可以用以下方法直接测定。测定的流程是，称取0.2-0.5g风干的植物材料，放入100ml烧杯中，加入50ml水，煮沸5min，在40-50℃下保温30min。徐徐加入10ml6%硫酸铜，摇匀，静置l h（或过夜）。过滤，残渣按凯氏定氮法将残渣消化，蒸馏，测定收集液中氨，计算得出含氮量。 非蛋白质氮包括溶于水的氮化物，如氨基酸、酸性氮和有机含氮碱等。其总量
一台 WB 成像系统可以同时拍摄化学发光和荧光信号，这个功能有什么用途呢？一篇 2014 年发表在 Cell Stem Cell 的文章为了研究硫巯基化如何影响信号通路，就需要在进行 Western Blot 时同时捕捉2种信号。 蛋白质硫巯基化（S-sulfhydration, SHY）是一种依赖H2S的蛋白质翻译后修饰。H2S 作用于蛋白质的半胱氨酸残基，把巯基（-SH）转变为硫巯基（-SSH），改变蛋白空间结构，调控了蛋白的活性和功能。 这篇文章主要研究硫化氢（H2S）调节 Ca
着（例如：β -丙氨酸，γ -氨基丁酸）。氨基酸是本世纪初由费歇尔等（ E． Fisher etal．）阐明的。构成一般蛋白质的有 23种（半胱氨酸和胱氨酸另计），立体构型均属 L-型。这些氨基酸的简称详见“氨基酸合成”词目中。氨基酸根据氨基与羧基数分类为中性即一氨基一羧酸（如丙氨酸、亮氨酸等），酸性即一氨基二羧酸（如天冬氨酸、谷氨酸），碱性的即二氨基一羧酸（如赖氨酸）等。此外还把含有芳香环、羟基、巯基的氨基酸分别分类为芳香族氨基酸（如酪氨酸、苯丙氨酸、色氨酸）、含羟基氨基酸（如丝氨酸、苏氨酸）、含硫
