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抗坏血酸过氧化物酶活性检测试剂
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6个月
APX含量测试盒
152
上海机纯实业有限公司
100T/96S
注 意:正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。测定意义:APX是植物清除活性氧的重要抗氧化酶之一,也是抗坏血酸代谢的关键酶之一。APX具有多种同功酶,分别定位于叶绿体、胞质、线粒体、过氧化物和乙醛酸体,以及过氧化体和类囊体膜上。APX 催化H2O2氧化AsA,是植 AsA 的主要消耗者。APX的活性直接影响到AsA的含量,APX与AsA具有一定的负相关性。测定原理:APX 催化H2O2氧化AsA,通过测定AsA氧化速率,来计算得APX活性。自备仪器用品:低温离心机、紫外分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板(UV板)、移液枪、研钵、冰和蒸馏水。
试剂组成和配制:试剂一:液体120mL×1瓶,4℃保存。试剂二:粉剂×1瓶,4℃保存。临用前加3 mL蒸馏水充分溶解。试剂三:液体3mL×1支,4℃保存。粗酶液提取:按照组织质量(g):试剂一体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL试剂一)进行冰浴匀浆。13000g,4℃离心20min,取上清置冰上待测。测定:1. 分光光度计/酶标仪预热30 min以上,调节波长到290nm,用蒸馏水调零。2. 试剂一在25℃中预热30min。3.依次在微量石英比色皿/96孔板中加入20μL上清液、140μL预热的试剂一20μL试剂二和20μL试剂三,迅速混匀后在290nm测定10s和130s光吸收A1和A2,△A=A1-A2。
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