谷氨酰胺酶活性检测试剂盒 | GLS含量测试盒_微量法

注    意：正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
测定意义：
GLS（EC 3.5.1.1）是酰胺基水解酶，催化天冬酰胺水解成谷氨酸和氨，在氮素代谢中具有重要调控作用，尤其是调节游离氨含量和尿素代谢。

测定原理：
GLS催化谷氨酰胺水解成L-谷氨酸和氨，利用奈氏试剂检测氨增加的速率，即可计算其酶活性。

需自备仪器和用品：
台式离心机、酶标仪、96孔板、可调式移液枪、研钵、冰和双蒸水。

试剂组成和配制：
试剂一×2瓶，60 mL，4 ℃保存；
试剂二×1瓶，40 mL，4 ℃保存；
试剂三×1瓶，60 mL，常温保存；
试剂四×1瓶，5 mL，常温保存；
试剂五×1瓶，3 mL，常温保存；
试剂六×1瓶，3 mL，常温避光保存。

粗酶液提取：
1、细菌、细胞或组织样品的制备：
细菌或培养细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量（104个）：试剂一体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细菌或细胞加入1mL试剂一），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30次）；8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
组织：按照组织质量（g）：试剂一体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL试剂一），进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
2、血清（浆）样品：直接检测。