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- gelatins
- 国内
- JCsw_1506
- 2025年07月12日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
低温保存
- 保质期：
6个月
- 英文名：
GalLDH测试盒
- 库存：
496
- 供应商：
上海机纯实业有限公司
- 规格：
50管/48样
注 意 ：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
测定意义：
L-半乳糖途径是合成AsA的主要途径。Gal LDH位于线粒体内膜，负责催化植物体内AsA生物合成的后一步，也是该途径的关键酶之一，对植物体内AsA含量的积累起着至关重要的作用。
测定原理：
Gal LDH催化L-半乳糖内酯还原细胞色素c（Cyt c），还原型Cyt c在550nm有吸收峰；测定还原型Cyt c增加速率，来计算Gal LDH活性。
自备仪器和用品：
台式离心机、可见分光光度计、1mL玻璃比色皿、可调式移液器、研钵、冰和蒸馏水。
试剂组成和配制：
试剂一：液体50mL×1瓶，4℃保存。
试剂二：粉剂×1瓶，4℃保存。临用前加入40mL蒸馏水，充分溶解。
试剂三：粉剂×1瓶，4℃保存。临用前加入5mL蒸馏水，充分溶解。
粗酶液提取：
按照组织质量（g）：试剂一体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL试剂一）进行冰浴匀浆。13000g，4℃离心10min，取上清置冰上待测。
Gal LDH测定操作：
1. 分光光度计预热30 min，调节波长到550nm，蒸馏水调零。
2. 试剂二在25℃水浴锅中预热30 min。
3. 依次在1mL玻璃比色皿中加入100μL上清液、800μL预热的试剂二和100μL试剂三，迅速混匀后于550nm比色，记录10s和130s的吸光值A1和A2，△A = A2﹣A1。
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文献和实验MTT分解产生兰色结晶状甲赞颗粒积于细胞内和细胞周围。其量与细胞数呈正比，也与细胞活力呈正比。 l、细胞悬液以1000rpm离心10分钟，弃上清液。 2、沉淀加入0.5－1ml MTT，吹打成悬液。 3、37℃下保温2小时。 4、加入4—5 ml酸化异丙醇（定容）。打匀。 5、1000 rpm离心，取上清液酶标仪或分光光度计570nm比色，酸化异丙醇调零点。 注意：MTT法只能测定细胞相对数和相对活力，不能测定细胞绝对数。 第五节 细胞的分裂指数 一、原理:体外
