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文献和实验轮状病毒(rotavirus,RV)纯化方法,仅供参考方法一氯化铯密度梯度离心纯化法(用密度梯度来做,首先我们需要什么样的转头,角式的,或者是甩平转头,一般用甩平转头。在准备密度梯度时,对病毒的浮力密度要清楚是多少,具体数字,然后我们才能知道用多大浓度的梯度介质。)1、病毒浓缩(1)PEG沉淀病毒:在收集到的病毒上清加入终浓度5%的PEG6000, 4℃搅拌过夜,10,000rpm, 4℃, 1.5小时离心,弃上清,用TNMC缓冲液(50mM Tris-Hcl pH7.5, 100mM
标本中Ag+检测Ab(豚鼠抗病毒Ab)+酶标Ab(单抗豚鼠Ab+物、显色、读取结果、WHO将此法列为诊断RV的标准方法,国内外都已有ELISAHRVKit商售,最近已生产出抗HRV的McAb使ELISA的度大大提高,而且型特异的McAb可以分型研究, 3.补洁(CF):将粪便或组织细胞培养中轮状病毒提片,浓缩后作为抗原,以动物RV的"O"因子作为补洁抗原,检测人血清中抗人RvAb为克服粪便的抗补作用,可在标本中加牛血清处理后提纯Ag。 4.放射免疫试验(vadio-immunoassay
有替代前者的趋势。由于ABS-ELISA较普通ELISA多用了两种试剂,增加了操作步骤,在临床检验中ABS-ELISA应用不多。科研项目中检测微量的成分如细胞因子常采用本法。晶美分装ELISA KIT采用的方法:1, TORCH及传染病试剂盒(间接法),见2.2.32, TORCH-IgM捕获法特色:包被抗体,标记抗原原理:3, 细胞因子试剂盒采用的方法路线(ABC-ELISA)原理产品特色:采用ABC法,灵敏度更高,特异性更强。生物素抗体和酶联物是浓缩的,使用前需用相应的缓冲液稀释。酶联物可以通用
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