甘油三酯(TG)检测试剂盒(乙酰丙-酮微板法)

甘油三酯(TG)检测试剂盒(乙酰丙-酮微板法)
产品简介：
甘油三酯(Triglyceride，TG)又称三酰甘油或三油酸甘油酯，是三分子长链脂肪酸和一分子甘油形成的脂肪分子，是人体内含量多的脂类，大部分组织均可以利用甘油三酯分解产物供给能量，同时肝脏、脂肪等组织还可以进行甘油三酯的合成，目前检测甘油三脂的常用方法有酶法和化学法，酶法测定具有简便、快捷、微量且试剂稳定等优点，适用于手工和自动化测定，化学法是使用异丙醇等有机溶剂从血清中抽提出甘油三酯，再经皂化、氧化，由显色反应进行测定，目前常用的化学法是乙酰丙-酮比色法。

甘油三酯(TG)检测试剂盒(乙酰丙-酮微板法)其检测原理是组织匀浆液或血清中的甘油三脂被异丙醇提取出来，经氧化铝吸附磷脂等干扰因素，再经皂化后释放出甘油，后者被氧化剂氧化生成甲醛，甲醛与乙酰丙-酮在铵离子存在下生成的3,5-二乙酰-1,4-双氢二甲基吡啶(Hantgsch反应)，用酶标仪在420nm处进行比色测定，与相同处理的标准管对比计算其含量，用于人或动物的血清、血浆、脑脊液等样本中的甘油三脂含量定量测定，本方法所用试剂比较稳定，室温下即可保存半年以上，检测较灵敏，在0.04~0.8mg/ml（0.045~0.904mmol/L）之间有良的线性关系。该试剂盒仅用于科研领域，不适用于临床诊断或其他用途。

自备材料：
1、生理盐水、异丙醇
2、离心机、天平
3、离心管、小试管
4、恒温箱
5、酶标仪、96孔板

操作步骤(仅供参考)：
1、准备样品：
①血清样品，取0.1ml血清加入有盖的离心管，向管底吹入2.4ml异丙醇。②组织样品，准确称取适量组织样品(质量为m)，按质量(g)：生理盐水(ml)=1：4的比例，加入生理盐水，冰浴条件下手动或机械匀浆，获取匀浆液(体积为VT)，取0.2ml匀浆液加入有盖的离心管，向管底吹入2.3ml异丙醇。
③混合后置于60℃水浴2min，然后加入0.5g氧化铝，加盖，快速振摇2min，3000g离心5min，取上清液(即抽提液)，待用。
2、配制Glycerol标准工作液：按Glycerol标准(4mg/ml)：蛋白沉淀液=1：49的比例，配制合适量的Glycerol标准工作液，其浓度为0.08mg/ml。
3、TG加样：按照下表设置空白孔、对照孔、测定孔，溶液应按照顺序依次加入，并注意避免产生气泡；如果样品中的TG含量过高，可减少样品用量或适当稀释后再进行测定。

注意事项：
1、本法可直接用于检测脑脊液中的TG含量和尿液中的TG含量。
2、待测样品如不能及时测定，应置于2~8℃保存，3天内稳定。
3、该方法的线性范围是0.04~0.8mg/ml，R2=0.989，0.6mg/ml以内比较准确，超过0.8mg/ml，OD值不稳定，变化较大，值偏低，因此样品浓度超出上述范围应做稀释后再次定量，结果乘以稀释倍数。
4、显色后吸光度会随时间发生变化，故应及时比色，当标本过多时，可置冰箱中逐一比色。
5、皂化、氧化、显色时间和温度对显色结果及终的吸光度均会造成影响，所以每批次测定都应同时做标准对照。
6、做血浆标本时，应注意抗凝剂的影响，通常使用EDTA.2K做抗凝胶，浓度为1mg/ml。

附录：参考标准曲线范围：
测定TG标准0.04、0.08、0.1、0.2、0.4、0.6、0.8、1、2、4mg/ml在420nm时吸光度