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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
999
- 英文名:
FC检测试剂盒
- 保质期:
6个月
- 供应商:
上海晶抗生物工程有限公司
- 保存条件:
避光低温保存
- 规格:
100T
产品简介:
胆固醇(Cholesterol)又称胆甾醇,是一种环戊-烷多氢菲的衍生物,广泛存在于动物体内,其中脑、神经组织丰富,在肾、脾、皮肤、肝和胆汁中含量也较高,用酶学方法测定游离胆固醇(FC)是生化检测中的常用方法,其特点是:1、灵敏度、准确度、精密度均高;2、使用温和的反应条件;3、操作简便;4、适用于自动分析仪。
游离胆固醇(FC)检测试剂盒(COD-PAP双试剂比色法)又称胆固醇氧化酶法或胆固醇氧化酶-过氧化物酶偶联法等,血液中的胆固醇约1/3为游离胆固醇,2/3为与脂肪酸结合的胆固醇酯,后者被胆固醇酯酶(CEH)水解为游离胆固醇,游离胆固醇被胆固醇氧化酶(COD)氧化成胆甾烯酮,并产生过氧化氢,再经过氧化物酶(POD)催化,使4-氨基安替比林与酚(三者合称PAP)反应,生成红色醌亚胺色素(Trinder反应),当CEH不存在时胆固醇酯不能被水解,因而只能检测到游离胆固醇的含量,分光光度计在500~520nm处进行比色测定,盒用于定量测定人或动物的血清、血浆、脑脊液、细胞、组织等样本中的游离胆固醇含量。该试剂盒仅用于科研领域,不适用于临床诊断或其他用途。
自备材料:
1、生理盐水或PBS
2、离心管、小试管或96孔板
3、水浴锅或恒温箱
4、分光光度计或酶标仪
5、全自动或半自动生化分析仪
操作步骤(仅供参考):
1、样本处理:
①血清、血浆、脑脊液样本:从待测样本中分离出的血清或血浆不应有溶血,直接检测,如超过线性范围,用生理盐水稀释后检测。
2细胞样本:
a.取适量的细胞(一般推荐>106以上),1000g离心10min,弃上清,留取沉淀。
b.用PBS或生理盐水清洗1~2次,1000g离心10min,弃上清,留取沉淀。
c.加入200~300μl的PBS或生理盐水匀浆,冰浴条件下超声破碎细胞,功率300W,每次3~5s,间隔30s,重复3~5次;亦可手动匀浆,制备的匀浆液不可离心;亦可用1~2%TritonX-100冰浴30~60min,制备的裂解液不可离心。
③组织样本:准确称取适量组织样本,按质量(g):生理盐水或PBS(ml)=1:9的比例,加入生理盐水或PBS,冰浴条件下手动或机械匀浆,2500~3000g离心10min,取上清。
2、FC测定
①各种仪器按上表依次加入试剂。充分混匀,37℃水浴中孵育5min。
②立即用相应仪器测定500~520nm吸光度,以空白孔(管)调零,读取标准孔(管)、测定孔(管)的吸光度,分别记为A标准、A测定。
干扰因素 胆红素<410μmol/L;血红蛋白<7g/L;甘油三脂<28.5mmol/L时,对结果无明细影响。
注意事项:
1、上述低温试剂避免反复冻融,以免失效或效率下降。
2、COD-PAP工作液如不经常使用,应充分溶解后分装-20℃保存,可4℃短期保存。
3、本法可直接用于检测脑脊液中的FC含量,但不能直接检测尿液中的FC含量,因为未
经处理的尿液中含有还原性物质,影响过氧化物酶反应。
4、检测FC的血清或血浆宜用EDTA或肝素抗凝,如不能及时测定,密闭保存,4℃可稳定1周,-20℃可以稳定半年以上。
5、本法线性范围可达13mmol/L,如果样本FC浓度过高,结果可能呈假性降低,应用生理盐水稀释后重测,结果乘以稀释倍数。
6、该试剂盒既可作终点法检测,又可作速率法检测。
7、本法不适于检测总胆固醇的浓度,如需检测总胆固醇(TC)含量,请选择相关产品。
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文献和实验物质浓度。 两点终点法常应用于双试剂的测定项目中,多数第一试剂通常只含缓冲液等成分,它与样本一般不起特异性反应;因此在第二试剂加入前,选择一个测光点作为第一读数点,此时的吸光度相当于样品空白。加入第二试剂后待测物质起反应,并经过一定时间反应到达平衡点,此时选择第二个读数点,两读数点吸光度之差用于计算待测物质浓度。 两点法能有效消除样品溶血、黄疸、脂浊等造成的光吸收干扰。如:酶法测定葡萄糖、总胆固醇、甘油三酯、尿酸、肌酐,以及化学法测定总蛋白、总胆红素、直接胆红素、钙、磷、镁、铁等;并且都能在加入
为对兔疫球蛋白Fc部分c末端的受体。对具有该受体的细胞,通过抗体与抗原结合时,细胞将发挥如下的特有机能:(1)原噬菌体对IgG,占多形核白细胞大部分的嗜中性细胞对IgG、IgA具有Fc受体,通常通过与抗原结合的抗体以及有时与游离的抗体(嗜细胞性抗体)结合来捕捉抗原,并经吞噬作用将之围吞。(2)B细胞的大部分(80%以上)具有对IgG的Fc受体,这些都不进行产生抗体的细胞分化,可通过与抗原抗体复合体的结合而被活化,释放产生抗体的细胞限制因子。(3)T细胞约有10%具有Fc受体,主要
类激素和维生素D3等。胆固醇主要随胆汁从粪便排出体外。血液中的胆固醇仅有不到20%是从食物中摄取的,其余均由机体自身合成,肝、肠、肾、骨髓及内分泌腺等均是合成场所。由于血液与组织内的胆固醇经常不断地交换,因此血清胆固醇水平基本能够反应胆固醇的摄取、合成及转送情况。胆固醇与动脉粥样硬化等有一定联系,据国外报道体内胆固醇长期偏低,是诱发癌症的因素之一。因此,胆固醇的测定是临床最普遍检测项目之一。胆固醇在体内以游离胆固醇(free cholesterol,FC)及胆固醇酯(cholesterol ester
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