肌酐(Cr)检测试剂盒(去蛋白终点微板法)

肌酐(Cr)检测试剂盒(去蛋白终点微板法)
产品简介：
肌酐(creatinine，Cr)是人体或动物肌肉内代谢的产物，每20g肌肉代谢可产生约1mg肌酐，由肾小球滤过排出体外，外源性肌酐是肉类食物在体内代谢后的产物，内源性肌酐是体内肌肉组织代谢的产物。

肌酐(Cr)检测试剂盒(去蛋白终点微板法)检测原理是肌酐与ku-味-酸盐发生Jaffe反应，生成橘红色的ku-味-酸肌酐复合物，该复合物生成量与肌酐含量呈正比，通过酶标仪测定510nm处吸光度，可用于检测人体、动物的血浆、血清、尿液样品中肌酐含量。该试剂盒仅用于科研领域，不适用于临床诊断或其他用途。

自备材料：
1、1.5ml离心管、96孔板
2、离心机、酶标仪
3、蒸馏水

操作步骤(仅供参考)：
1、准备样品：血浆、血清按照常规方法制备，-20℃冻存。取血清或血浆0.05ml，加入蛋白沉淀液0.45ml，充分混匀，静置5min后3500r/min离心10min，取上清液，4℃保存待用；尿液中肌酐含量较高，应先用蒸馏水作50~200倍稀释后再测。
2、配制标准品工作液：取肌酐标准(10mmol/L)，按肌酐标准(10mmol/L)：肌酐标准稀释液=1:99的比例混合，使浓度达到100μmol/L，即为标准品工作液-肌酐标准(100μmol/L)；4℃保存，1周有效。
3、Cr加样：按照下表设置空白孔、标准孔、测定孔，溶液应按照顺序依次加入，并注意避免产生气泡。如果样品中的Cr浓度过高，可以减少样品用量或适当稀释后再进行测定。
4、Cr检测：充分混匀，室温放置15min，酶标仪检测510nm吸光度，空白孔调零，读取各孔吸光度，分别为A标准、A测定。

内生肌酐清除率值(L/24h)=尿液肌酐(μmol/L)/血清肌酐(μmol/L)×24h尿量(L)
校正的内生肌酐清除率值(L/24h)=内生肌酐清除率值×1.73/体表面积(m2)



注意事项：
1、测定各孔时，各孔温度均需达到室温，否则影响结果。
2、轻度溶血样本对肌酐测定无影响；尿液样品中肌酐含量较高，样品需做50~200倍稀释，如果显色后吸光度仍较高，还需将尿液继续扩大稀释倍数，重新检测。
3、呈色后标准管吸光度较稳定，但测定管吸光度随时间延长而增加；另外肌酐浓度越高，吸光度变化越快，因此加入显色剂后30min内完成检测为宜。
4、以标准品做梯度实验，200μmol/L以下浓度呈不同程度的-橙，超过200μmol/L颜色逐渐加深，呈橘红色，到1000μmol/L呈深橘红色；用酶标仪测定100μmol/L，吸光度值在0.3左右。
附录：标准曲线制作：在室温条件下按说明书操作，用酶标仪505nm对标准梯度进行吸光度的测定，其数值及标准曲线如下(仅供参考)：