- ￥1190
- 晶抗生物
- JK-R7626
- 国内
- 2025年07月12日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
999
- 英文名：
PP检测试剂盒
- 保质期：
6个月
- 供应商：
上海晶抗生物工程有限公司
- 保存条件：
避光低温保存
- 规格：
50T
产品简介：
天然果胶类物质以原果胶、果胶(Pectin)、果胶酸的形态广泛存在于植物的果实、根、茎、叶中，是细胞壁的一种组成成分，它们伴随纤维素而存在，构成相邻细胞中间层粘结物，使植物组织细胞紧紧黏结在一起，原果胶是不溶于水的物质，但可在酸、碱、盐等化学试剂及酶的作用下，加水分解转变成水溶性果胶；果胶(Pectin)又称多聚半乳糖醛酸，是由D-半乳糖醛酸以α-1,4糖苷键连接形成的直链状聚合物，本质上是一种线形的多糖聚合物，含有数百至约1000个脱水半乳糖醛酸残基，其相应的平均相对分子质量为50000~150000；原果胶是一种非水溶性的物质，在未成熟的果实或植物组织中果胶物质大多与纤维素结合以原果胶的形式存在，原果胶能使果实或其他植物组织坚硬、变脆。
原果胶(PP)检测试剂盒(咔-唑微板法)检测原理是果胶物质水解生成半乳糖醛酸，后者在硫酸溶液中咔-唑进行缩合反应形成紫红色的化合物，该化合物呈色强度与半乳糖醛酸浓度成正比，该化合物颜色在反应1~2h内呈色深，当反应液颜色深时在波长530nm处测定吸光度，通过与标准曲线比较，计算出样品中原果胶或可溶性果胶含量。该试剂盒主要用于定量检测植物组织或果实中原果胶含量，亦可用于定量检测植物组织或果实中可溶性果胶含量，进而计算出总果胶含量(为原果胶含量与可溶性果胶含量之和)，该50T试剂盒可以检测50~60左右个样品。该试盒仅用于科研领域，不适用于临床诊断或其他用途。
自备材料：
1、蒸馏水、浓硫酸
2、实验材料：桃子、李子、苹果、杏等果实或其他植物组织
3、研钵或匀浆器
4、离心管或试管
5、离心机、水浴锅
6、比色杯、分光光度计
操作步骤(仅供参考)：
1、可溶性及原果胶提取：
①取果实或其他植物组织，洗净，擦干，称取剪碎的新鲜样品0.1g，置于研钵或匀浆器。
②加入1mlSPLysisbuffer，充分研磨或匀浆后转入5ml离心管或试管中，用SPLysisBuffer冲洗研钵或匀浆器并转移至离心管或试管中，补加SPLysisBuffer至5ml。
③沸水浴30min，在煮沸过程中及时补加SPLysisBuffer至5ml，取出冷却至室温，8000g离心15min，弃上清液；重复该步骤2次，以去除样品中的糖分以及其他物质。
④取含有沉淀的试管，加入2ml蒸馏水，50℃水浴30min以溶解果胶，取出冷却至室温，8000g离心15min，将上清液转移至新离心管或试管中；用少量蒸馏水洗涤沉淀，8000g离心15min，一并将上清液转移至上述新离心管或试管中，加蒸馏水定容至5ml，即为可溶性果胶提取液。
⑤取上述可溶性果胶提取液，8000g离心15min，弃上清液，向离心管或试管中加入2mlPPLysisBuffer，沸水浴1h，取出冷却至室温，8000g离心15min，加蒸馏水定容至5ml，即为原果胶提取液。
2、稀释果胶标准溶液：取适量的果胶标准(1mg/ml)，按下表进行稀释：
3、PP加样：按照下表设置空白管、标准管、测定管，溶液应按照顺序依次加入，并注意避免产生气泡，小心混匀。如果样品中的果胶浓度过高，可以减少样品用量或适当稀释后再进行测定，样品的检测能设置3平行管，求平均值。
※注意：浓硫酸具有强腐蚀性，应小心操作，沿管壁缓慢加入。
4、PP测定：取上述空白管、标准管、测定管中溶液各200μl，加至96孔板的孔中，加入6μlSPAssayBuffer，避光静置0.5~2h，当显色深时以酶标仪，以空白调零，测定系列标准孔、测定孔在530nm处吸光度。如果测定原果胶含量，以原果胶提取液作为测定管；如果测定可溶性果胶含量，则以可溶性果胶作为测定管；如果测定总果胶含量，则同时以原果胶作为测定管和可溶性果胶作为测定管。
计算：
以1~5号管系列果胶标准(4、8、12、16、20μg)为横坐标，以对应的吸光度为纵坐标，绘制标准曲线，直接计算直线回归方程。果胶=原果胶+可溶性果胶。组织样品的果胶(μg)={m×VT×2}/(W×Vs×0.2)式中：m=根据标准曲线求得的测定管果胶含量(μg)VT=原果胶(或可溶性果胶)提取液总体积(ml)2=加入浓硫酸后反应液体积(ml)Vs=加样时所用原果胶(或可溶性果胶)提取液的体积(ml)=0.2W=样品鲜重(g)0.2=加入反应液体积(ml)液体样品的果胶(μg/ml)=m×N×2/V×0.2式中：m=根据标准曲线求得的测定管果胶含量(μg)N=稀释倍数2=加入浓硫酸后反应液体积(ml)V=加样时所用原果胶(或可溶性果胶)提取液的体积(ml)=0.20.2=加入反应液体积(ml)
注意事项：
1、浓硫酸具有强腐蚀性，应小心操作，沿管壁缓慢加入。
2、取样量、试剂用量应根据果胶含量适当调整。
3、可溶性糖对测定结果有较大影响，应彻底去除样品中的可溶性糖。
4、PPAssayBuffer应密闭避光保存，避免有效成分挥发，其反应时间根据具体情况而定。
5、如果没有酶标仪也可以使用普通的分光光度计测定，但应考虑分光光度计的小检测体积。
6、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
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文献和实验基于膜的检测试剂研发人员应该严格考虑影响蛋白质在硝酸纤维素膜上结合众多因素，其中包括原材料的固有属性和处理过程等。随着胶体金标记技术的发展、研发人员对胶体金快速检测技术深入研究，市场上基于膜的快速免疫层析检测产品的种类迅速增多。虽然免疫层析产品的包装设计种类繁多，实际上目前主流的商品化检测试剂盒主要下面两种形式。最常用的检测形式为侧向层析或者层析定量，这种检测形式通常应用于诊所或者由直销客户检测。另一种检测形式为竖向斑点渗滤，该检测形式需要较强的操作技巧，仅限于研究使用。不管试剂采用那种检测
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) Millipore Immobilon-P (cat. 编号 1PVH20200 ) 或其他 Western 杂交膜。 ( 20 ) 免疫印迹的转膜缓冲液：25 mmol/L Tris-HCl、192 mmol/L 甘氨酸、20% 甲醇或其他合适的转膜缓冲液。 ( 21 ) 已知胞内蛋白质的抗体，如咖啡酰辅酶 A - 邻甲基转移酶（CCoAOMT ) 。 ( 22 ) Amersham 的 ECL 试剂盒（cat. 编号 RPN 2109 ) 或其他商业的 Western 杂交检测试剂盒
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