单胺氧化酶(MAO)检测试剂盒(醛苯腙微板法)

单胺氧化酶(MAO)检测试剂盒(醛苯腙微板法)
产品简介：
单胺氧化酶(MonoamineOxidase，MAO)是一组催化多种单胺类化合物氧化脱氨的酶，属于细胞外酶，含有铜离子，分布于肝脏、肾脏等组织的线粒体内，其含量分布为肝脏＞心脏＞肾脏＞脑＞肺＞骨骼肌，血小板、胎盘中也含有MAO。线粒体中的MAO与膜紧密结合，仅少量为可溶性的，存在于细胞质中，血液和结缔组织中的MAO为水溶性。

单胺氧化酶(MAO)检测试剂盒(醛苯腙微板法)其检测原理是待测样品在MAO作用下，氧化底物苄胺生成苄醛，后者经催化反应生成醛苯腙呈棕红色，通过酶标仪检测470nm处吸光度，根据标准曲线即可测出MAO活力，100T试剂盒可检测样本数约为45个。该产品仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。

自备材料：
1、蒸馏水
2、离心管或小试管、精密天平
3、酶标仪、96孔板、恒温箱或水浴锅

操作步骤(仅供参考)：
1、准备样品：
①血浆、血清和尿液样品：血浆、血清按照常规方法制备，可以直接用于本试剂盒的测定，
尿液通常也可以直接用于测定，-20℃冻存，用于MAO的检测。
②细胞或组织样品：取恰当细胞或组织进行匀浆，低速离心取上清，-20℃冻存，用于MAO
的检测。
③高活性样品：如果样品中含有较高活性的MAO，可以使用MAOAssaybuffer稀释。
2、稀释标准品：用MAOAssaybuffer稀释苄醛标准(5mmol/L)至0.5mmol/L，即为苄醛标准工作液(0.5mmol/L)，4℃保存备用，按下表制备标准曲线。
3、MAO加样：按照下表设置空白管、对照管、标准管、测定管，溶液应按照顺序依次加入(96孔板中)，并注意避免产生气泡。如样品中的酶活性过高，可以减少样品用量或适当稀释后再进行测定。
4、MAO测定：混匀，96孔板中以蒸馏水调零，酶标仪470nm处测定各孔吸光度(记为A
空白、A标准、A对照、A测定)。

计算：MAO活性单位的定义：在37℃1ml血清中MAO1h催化底物产生1nmol苄醛为一个MAO酶活力单位，根据酶活性定义计算出样品中的MAO活性。
以60μl系列标准品(1~6号)所含苄醛nmol数对应的MAO活性单位(nmol/h∙ml)为横坐标，以(A标准-A空白)吸光度之差值为纵坐标，绘制标准曲线，用待测样品(A测定-A对照))吸光度之差值在标准曲线上查出待测样品的MAO活性。当酶活力高于200U/ml时，应将样品适当稀释后重新测定，结果乘以稀释倍数。

注意事项：
1、胆红素浓度小于257μmol/L，血红蛋白浓度小于4g/L，对MAO活力检测没有影响。
2、标准曲线制作中各管苄醛nmol数乘以31.25得MAO活性单位数。
3、若将上述定义的酶活性单位更换为国际单位，应除以60。
4、加入苄醛显色缓冲液后，应1h内检测完毕。
5、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

附录：参考标准曲线范围：在室温条件下通过分光光度计470nm测定MAO活性标准在0、12.5、25、50、100、150、200U/ml时的吸光度，并做出其标准曲线如下：

注意：由于检测仪器和操作手法等条件的不同，参考值范围会有不同，该值仅供参考，对于要求精确计算苄醛含量的，可以进行多点重复测定；根据测定经验显示12.5U/ml以下、200U/ml以上标准曲线会有偏差。