人原代真皮毛乳头细胞

人原代真皮毛乳头细胞

产品编号： XY-S005
产品规格：>5×105细胞数

包装规格：T-25培养瓶

细胞详述：
真皮毛乳头细胞位于毛囊基底部，是一类成纤维细胞。在毛囊发育早期，真皮细胞向单层上皮细胞发出第一真皮信号，刺激上皮局部形成毛基板。随后毛基板细胞向下方的真皮发出第一表皮信号，诱导其形成有成纤维细胞组成的凝集细胞团。在此过程中，毛母质细胞逐渐包裹凝集细胞团，形成成熟的真皮毛乳头细胞。作为毛囊中的重要细胞群，真皮毛乳头细胞的分子机制和临床应用正在被逐渐认识和解析。

细胞特性:

1.  细胞来源于手术切除的正常头皮组织。
2.  细胞鉴定：纤维连接蛋白（Fibronectin）免疫荧光染色为阳性。
3.  经鉴定细胞纯度高于90%。
4.  不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。
5.  细胞生长方式：成纤维样细胞，贴壁培养。

推荐培养基：
我们推荐使用原代成纤维细胞培养体系作为体外培养原代真皮毛乳头细胞的培养基。

实验步骤

（1）细胞爬片
取3片玻璃片于24孔板中，每孔加入培养基1mL，加入细胞0.02million个/孔。置培养箱2h或过夜。
（2）固定
细胞爬片后，吸出培养基，用PBS洗1遍，加入4% PFA于4℃固定30min。用PBS洗3×5min/次。也可最后一次不吸出PBS，放4℃过夜。
（3）破膜封闭
将玻片除去水分，置于培养皿支撑物上，
玻璃片封闭液配置：0.5% Trition X-100与PBS 1:1混合，再加10% 血清，
取50uL破膜封闭液滴于防水膜上，将玻片上有细胞的一面盖上2h。
（4）一抗孵育
一抗配制：抗体与PBS 1:100（200）稀释
破膜封闭后，取50uL一抗于防水膜上（湿盒中），将玻片（有细胞的一面）盖上置于4℃（最多可放置一周）
（5）二抗孵育
室温避光孵育二抗（二抗:PBS=1:500）2h后，PBS洗3×5min/次，染DAPI（DAPI:PBS=1:1000）5min，PBS洗3×5min/次。
（6）包埋
玻片上各滴1滴Fluoromount-G，将有细胞的一面盖上。
鉴定细胞为P1代细胞
检验结果：

• 细胞免疫荧光鉴定照片：

Fibronectin：


 

• 检验基本情况：

经免疫荧光鉴定，该细胞纯度达到90%以上