TGL-200RD-57-R-S AXYGEN 200u

牛传染性鼻气管炎微量血清中和试验

细胞（BK或BT），用Earle’s液洗一次后，按原培养液1／10的量接毒。置37℃温箱吸附1h，然后加入pH7.1～7.2含青、链霉素200g/μgml的LE液至原培养液量，37℃培养，待80%～90％出现典型IBR病变时收获培养物，冻融2次后，3 000r/min离心10min，其上清即为病毒抗原。测定病毒滴度（TCID）并分装小瓶，贮于-70℃备用。半年内滴度保持不变。 3．病毒滴度测定 将制备的病毒抗原，用pH7.0～7.2的LE液作10倍递增稀释至10-7，每病毒稀释滴度液接种

最全面的MTT大汇总

）。4.培养时间。200ul的培养液对于10的4～5次方的增殖期细胞来说，很难维持68h，如果营养不够的话，细胞会由增殖期渐渐趋向G0期而趋于静止，影响结果，我们是在48h换液的。5.MTT法只能测定细胞相对数和相对活力，不能测定细胞绝对数。做MTT时，尽量无菌操作，因为细菌也可以导致MTT比色OD值的升高。6.理论未必都是对的。要根据自己的实际情况调整。7.实验时应设置调零孔，对照孔，加药孔。调零孔加培养基、MTT、二甲基亚砜。对照孔和加药孔都要加细胞、培养液、MTT、二甲基亚砜，不同的是对照孔加溶解

明胶

刮刀收集200目尼龙网上的组织（即牛脑微血管），将其置于离心管中，1500r/min离心洗涤10min。离心洗涤的脑微血管悬浮于的0.1%胶原酶中，旋涡振荡15sec以充分混匀，置于37℃恒温振荡水浴箱中振荡消化50min？ 取出后旋涡振荡15sec，1500r/min离心10min，弃上清，用20%BCS的培养基悬浮，接种于明胶铺被的培养瓶中（培养瓶中加入1%明胶 - D-Hank′s液洗涤3ml，37℃孵箱中放置24h，用前倒掉明胶溶液即得明胶覆盖的培养瓶），置于细胞培养箱中，37℃