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- 文献和实验
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- 供应商:
麦飞生物
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现货
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/
- 规格:
1000支/包,10包/箱
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文献和实验。 用 1000μl 移液管上下吹打肿瘤球状体 10-20 次,以生成单细胞悬液。正常吸出细胞悬液,但在排出细胞时,将吸管尖端在管底略微倾斜。产生的剪切力可促进所有残余细胞聚集体分解。进行肉眼检查,确认无大细胞聚集体残留。研磨后立即加入两倍体积的胰蛋白酶中和溶液 ( T6414 ) 或培养基。 注意:不要过度研磨,以免影响细胞活力。通过 40 μm 细胞过滤器过滤细胞悬液,可以除去未解离的细胞聚集体。 测定细胞数量和活力。以300 xg 离心细胞 5分钟。弃去上清液,将细胞以1X106个细胞
)离心10分钟。【如果希望分离DNA或蛋白质,保留中层和下层酚-氯仿相,有机相能保存在4°C一夜】 4. 弃去上清液(RNA沉淀为一层如凝胶样透明的小块附在管底和管壁),按每1 ml Trizol液加入至少1 ml的比例加入75%乙醇进行洗涤,涡旋混匀,4 ℃下7 500 g离心5分钟【RNA能够在-20 °C保存在75%乙醇中至少1年,4°C保存至少1周】 5. 小心弃去上清液,让沉淀的RNA在室温下自然干燥或真空干燥5-10分钟,注意不要干燥过分,否则会使RNA失去溶解性,导致
,可溶解TrueGel3D™水凝胶以回收活细胞或化学固定细胞。例如,30 μL凝胶可用培养基1:20稀释的300 μL TrueGel3D™酶促细胞回收液溶解(37 °C孵育30-60分钟)。凝胶溶解后,细胞悬液离心,并用新鲜培养基或生理缓冲液重悬沉淀细胞。重复此洗涤步骤一两次,去除残留的TrueGel3D™酶促细胞回收液。如若细胞要再次进行葡聚糖水凝胶包埋并继续培养,除酶操作尤其重要。如果TrueGel3D™酶促细胞回收液没有彻底清除,会使新形成的水凝胶不稳定。 凝胶多样化制备的细节变动 制备
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