- ￥1412
- AXYGEN
- 美国
- MR-300-R
- 2025年07月10日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商：
麦飞生物
- 现货状态：
现货
- 保修期：
/
- 规格：
960个/包，5包/箱
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文献和实验1. 收集标本：血清、血浆（ EDTA 、柠檬酸盐、肝素抗凝）、细胞培养上清液、组织匀浆等尽早检测， 2-8℃ 保存 48 小时；更长时间须冷冻（ -20 ℃ 或 -70 ℃ ）保存，避免反复冻融。 2. 标准品液配制：使用前加入 0.5ml 蒸馏水 混匀，配成 16000pg/ml 的溶液 。 设标准管 8 管，每管加入标本稀释液 300ul 。在第一管中加入 16000pg/ml 的标准品溶液 300ul 混匀后用加样器吸出 300ul ，移至第二管。如此反复
皿放置在 37℃ 条件下进行解离约 5-10min，直到所有的细胞都以小细胞块或单细胞的形式漂浮。 4、向每个孔中加入 5ml 的 DMEM-F12，以充分稀释 Dispase。 5、将所有细胞转移至离心管中，室温下 300g 离心 3min，收集沉淀细胞。加入 DMEM-F12 培养基，以 1:6 的比例接种在 Matrigel 包被的 24 孔培养板中，向每个孔中加入 0.5ml 预热的 mTeSR1 进行培养，至细胞汇合度达到 45-75%。 定向分化为内胚层和前肠球体 6、将 24 孔板
、在立体显微镜下，可以看到明显的 3D 结构。使用 200μl 移液器吸头从每个孔中收集球状体，并将大约 50 个球状体集中到 5ml 微量离心管中。 中肠和后肠球状体生长成人肠类器官 11、收集球状体后，将微量离心管垂直放置在管架上 10min，此时球体通过重力沉降到离心管底部。吸出上清，控制总体积在 25μl 左右。 12、将冻存的 Matrigel 在 4℃ 下过夜解冻，添加 B-27 补充剂(终浓度 1×)、R-spondin1 (终浓度 500ng/ml)，Noggin (终浓度100
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