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- 晶抗生物
- 10nmol/mL
- JK-R7167
- 国内
- 2025年07月07日
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- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商：
上海晶抗生物工程有限公司
- 库存：
493
- 样本：
来电咨询
- 标记物：
详见说明书
- 适应物种：
来电咨询
- 应用：
仅供科研研究使用
- 检测方法：
微量法
- 检测范围：
10nmol/mL
ATP含量测试盒_微量法
测定方法：微量法
产品规格：100管/48样
储存条件：低温保存
注 意：正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
测定意义：
ATP广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，是生物能量通货，能荷是描述细胞能量代谢状态的主要参数。测定ATP含量并且计算能荷，能够反映能量代谢状态。
测定原理：
肌酸激酶催化肌酸和ATP反应生成磷酸肌酸，可在700nm下用磷钼酸比色法检测磷酸肌酸含量，以此反应ATP含量。
自备仪器和用品：
分光光度计/酶标仪、水浴锅、可调式移液枪、微量石英比色皿/96孔板、研钵和蒸馏水。
试剂组成和配制：
酸性提取液：液体60mL×1瓶，4℃保存；
碱性提取液：液体60mL×1瓶，4℃保存；
试剂一：粉剂×1支，4℃保存；临用前加入1mL蒸馏水充分溶解待用；用不完的试剂分装后-20℃保存，禁止反复冻融。
试剂二：液体1.5mL×1支，4℃保存；
试剂三：粉剂×1瓶，4℃保存；临用前加入500μL蒸馏水充分溶解待用；用不完的试剂分装后-20℃保存，禁止反复冻融。
试剂四：液体5mL×1瓶，4℃保存；
试剂五：液体25mL×1瓶，4℃保存；
标准液：液体10mL×1瓶，2μmol/mLATP标准液，4℃保存；
测定步骤：
1、分光光度计或酶标仪预热30 min以上，调节波长到700nm，蒸馏水调零。
2、显色剂的配制：临用前请根据拟用显色剂体积（样本数×0.2 m L），按试剂四(mL)：试剂五（mL）=1：5的比例配制。用多少配多少。
3、样本测定：
| 试剂名称(μL) | 测定管 | 对照管 | 标准管 | 空白管 |
| 样本 | 10 | 10 | ||
| 标准液 | 10 | 10 | ||
| 试剂一 | 20 | 20 | ||
| 试剂二 | 10 | 10 | 10 | 10 |
| 试剂三 | 10 | 10 | ||
| 蒸馏水 | 30 | 30 |
| 显色剂 | 200 | 200 | 200 | 200 |
注意：空白管和标准管通常只需要各做一个。每个测定管设一个对照管。
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文献和实验原理。PKC底物被包被在酶标板上，在ATP存在的前提下，PKC激酶将底物磷酸化，洗掉游离的PKC激酶和其他成分。再加入特异性磷酸化抗体（只识别磷酸化底物，而与非磷酸化底物无交叉反应。）检测残留在酶标板上的磷酸化底物。通过酶标二抗放大信号，读出OD值（蛋白激酶活性与OD值的对数成正比）。与对照组相比，得出处理组的蛋白激酶活性 （PKA, PKB, PKC, SGK, S6K和Tyrosine Kinase）等非放射性蛋白激酶分析测试盒http://www.immunechem.com 本文
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