单宁酶(TAN)测试盒_微量法

单宁酶(TAN)测试盒_微量法
测定方法：微量法
产品规格：100管/48样
储存条件：低温保存
注   意 ：正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
测定意义：
单宁酶全称是单宁酯酰水解酶(Tannase，EC 3.1.1.20)，它可以水解没食子酸单宁中的酯键和缩酚羧键，生成没食子酸和葡萄糖。

测定原理：
使用抗氧化剂没食子酸丙酯（PG）作为单宁酶酶促反应的底物，在270nn下测定底物PG反应前后的光密度变化,计算单宁酶酶活力。

需自备的的仪器和用品：
紫外分光光度计/酶标仪、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔UV板、研钵、冰、蒸馏水

试剂的组成和配制：
试剂一：液体100mL×2瓶，4℃保存；
试剂二：粉剂×1支，4℃保存；临用前每支加入6mL试剂一，充分溶解后备用；用不完的试剂4℃保存；




测定步骤：
1、分光光度计预热30min以上，调节波长到270 nm，蒸馏水调零。
2、加样表

试剂名称（μL）	对照管	测定管
95℃水浴5min后灭活的粗酶液	50
粗酶液		50
试剂二	50	50

混匀，40℃准确保温10 min后，置95℃水浴中10 min（盖紧，防止水分散失），冷却

试剂一

900

900

混匀，取200uL至微量石英比色皿或96孔UV板中，270nm处读取各管吸光值。计算ΔA=A对照-A测定。每个测定管需设个一个对照管。

注意：

1.可以在不同对照管中加入不同样品的粗酶液，然后集中进行5min 95℃沸水浴处理。
2.务必使用96孔UV板（非普通酶标板，普通酶标板只能透过可见光，不能透过紫外光，检测波长小于340nm务必使用UV板）。