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- 晶抗生物
- JK-R7103
- 国内
- 2025年07月12日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商：
上海晶抗生物工程有限公司
- 库存：
595
- 样本：
来电咨询
- 标记物：
详见说明书
- 适应物种：
来电咨询
- 应用：
仅供科研研究使用
- 检测方法：
微量法
过氧化物酶(POD)测试盒_微量法
测定方法：微量法
产品规格：100管/96样
储存条件：低温保存
注 意 ：正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
测定意义：
POD（EC 1.11.1.7）广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，可催化过氧化氢氧化酚类和胺类化合物，具有消除过氧化氢和酚类、胺类毒性的双重作用。
测定原理：
POD催化H2O2氧化特定底物，在470nm有特征光吸收。
需自备的仪器和用品：
可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水
试剂的组成：
提取液：液体100mL×1瓶，4℃保存；
试剂一：液体25mL×1瓶，4℃保存；
试剂二：液体100μL×1支，4℃保存；
试剂三：液体100μL×1支，4℃保存。
测定步骤：
- 分光光度计或酶标仪预热30min以上，调节波长至470nm，蒸馏水调零。
- 工作液的配制：临用前将试剂一、试剂二、试剂三按照2.6（mL）：1.5（μL）：1（μL）的比例混匀；在37℃（哺乳动物）或25℃（其它物种）预热10min以上；现配现用。
- 在微量石英比色皿或96孔板中加入10μL样本和190μL工作液，混匀，记录470nm下1min时吸光值A1和2min后的吸光值A2。计算ΔA＝A2-A1。
注意：
如果ΔA小于0.005，可将反应时间延长到5min。如果ΔA大于0.5，可将样本用提取液稀释后测定，计算公式中乘以相应稀释倍数。
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文献和实验一、原理AsA-POD催化AsA与H2O2反应，使AsA氧化成单脱氢抗坏血酸（MDAsA）。随着AsA被氧化，溶液中290nm波长下的消光值（A290）下降，根据单位时间内A290减少值，计算AsA-POD活性。AsA氧化量按消光系数2.8（mmol/L）/cm计算，酶活性可用每克鲜重每小时氧化AsA的微摩尔数μMol/g·H表示。二、仪器离心机；紫外分光光度计；研钵；试管。三、试剂50mmol/L K2PO4－KH2PO4缓冲液（PH7.0，内含0.1mmol/L EDTA-Na2）
实验原理 AsA-POD催化AsA与H2O2反应，使AsA氧化成单脱氢抗坏血酸（MDAsA）。随着AsA被氧化，溶液中290nm波长下的消光度值（A290）下降，根据单位时间内A290减少值，计算AsA-POD活性。AsA氧化量按消光系数2.8(mmol/L)/cm计算，酶活性可用μmolAsA/(g FW•h)表示。 实验试剂 50mmol/L K2HPO4-KH2PO4缓冲液（pH7.0，内含0.1mmol/L
于水且不易褪色的棕色氧化性染料。AP是磷酸酯的水解酶，可通过靛蓝四唑反应显色。靛蓝四唑反应底物为溴氯羟吲哚磷酸盐(BCIP)，经酶水解并氧化形成靛蓝，而硝基蓝四唑(NBT)在氧化过程中被还原成不溶性紫蓝色沉淀。辣根过氧化物酶和碱性磷酸酶在SABC法染色前均可与亲和素―生物素分别制成链霉亲和素―生物素―辣根过氧化物酶复合物(SABC-POD)和链霉亲和素―生物素―碱性磷酸酶复合物(SABC-AP)复合物。
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