4-香豆酸：辅酶A连接酶(4CL)测试盒_可见分光光度法

4-香豆酸：辅酶A连接酶(4CL)测试盒_可见分光光度法
测定方法：可见分光光度法
产品规格：50管/24样    
储存条件：低温保存
注　意：正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定

测定意义：
4CL 是连接木质素特异合成途径的关键酶，主要催化肉桂酸生成相应的肉桂酸辅酶 A 酯，是合成木质素与其他苯丙烷类化合物的代谢流向调控点。该酶主要存在于高等植物、酵母和菌类中，研究该酶可以探讨多种生物细胞发育过程中木质素沉积的代谢机理，为减少水果石细胞含量而提高其品质提供依据。

测定原理：
4CL 催化 4-香豆酸和 CoA 生成 4-香豆酸 CoA，在 333nm 下测 4-香豆酸 CoA 生成速率，即可反映 4CL 活性。

需自备的仪器和用品：
紫外分光光度计、台式离心机、可调式移液器、1mL 石英比色皿、研钵、冰和蒸馏水。

试剂的组成和配制：
提取液：60mL×1 瓶，4℃保存；
试剂一：液体 60 mL×1 瓶， 4℃保存；
试剂二：粉剂×2 瓶，-20℃保存；





测定步骤：
1、 分光光度计 40℃预热 30min 以上，调节波长至 333nm，蒸馏水调零。
2、 样本测定
（1）在试剂二中加入 12.5mL 试剂一充分溶解混匀，置于 40℃水浴预热 10min；现配现用
（配后 24h 内用完）；
（2） 测定管：在 1mL 石英比色皿中加入 50μL 样本和 950μL 试剂二，混匀，立即记录
333nm 处 40℃反应 30min 后的吸光值 A2。


对照管：在 1mL 石英比色皿中加入 50μL 样本和 950μL 试剂一，混匀，立即记录333nm 处 40℃反应 30min 后的吸光值 A1，计算 ΔA=A2-A1。
注意：每个测定管设一个对照管。