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ADPG焦磷酸化酶(AGP)测试盒_可见分光光度法

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  • 2025年07月14日
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      上海晶抗生物工程有限公司

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      详见说明书

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    • 应用

      仅供科研研究使用

    • 检测方法

      可见分光光度法

    产品细节图片1


    ADPG焦磷酸化酶(AGP)测试盒_可见分光光度法
    测定方法:可见分光光度法
    产品规格:25管/24样    
    储存条件:低温保存
        正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
    测定意义
    AGP (EC 2.7.7.21)主要存在于植物中,催化葡萄糖-1-磷酸与ATP反应生成淀粉合成的直接前体ADPG,是植物淀粉生物合成的主要限速步骤。

    测定原理
    AGP催化的逆向反应生成G1P,在反应体系中添加的磷酸己糖变位酶和6-磷酸葡萄糖脱氢酶依次催化生成6-磷酸葡萄糖酸和NADPH340nm下测定NADPH增加速率,即可计算AGP活性。

    需自备的的仪器和用品
    紫外分光光度计、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1 mL石英比色皿、研钵、冰蒸馏水

    试剂的组成和配制
    提取液液体25mL×1瓶,4保存;
    试剂一:液体20mL×1瓶,4保存;
    试剂二:粉剂×14保存;临用前加入9mL蒸馏水充分溶解备用;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融
    试剂:粉剂×1瓶,-20保存;临用加入5mL蒸馏水充分溶解备用;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融


    产品细节图片2


    测定步骤
    1、分光光度计预热30min以上,调节波长至340nm,蒸馏水调零。
    2、试剂一置30保温10min以上。
    3、在EP管中按顺序加入下列试剂
    试剂名称μL 测定管
    试剂一 200
    试剂二 320
    样本 40
    混匀,30保温15 min,置沸水浴中1 min(盖紧,防止水分散失),冰浴迅速冷却后,4000g4℃离心5min,取上清液,在1mL石英比色皿中依次加入下列试剂
    上清液 400
    试剂一 425
    试剂 175
    混匀后,立即于340 nm波长下记录初始吸光度A1 2min后的吸光度A2,计算ΔA=A2-A1

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