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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
上海晶抗生物工程有限公司
- 库存:
829
- 样本:
来电咨询
- 标记物:
详见说明书
- 适应物种:
来电咨询
- 应用:
仅供科研研究使用
- 检测方法:
可见分光光度法
磷脂酶C(PLC)测试盒_可见分光光度法
测定方法:可见分光光度法
产品规格:50管/48样
储存条件:低温保存
注 意:正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
测定意义:
磷脂酶C(EC 3.1.4.3)是一种水解甘油磷酸酯C3位点甘油磷酸酯键的脂类水解酶,广泛存在于微生物及动植物的组织和细胞中,在细胞代谢、细胞传递、生长发育等方面具有重要作用。
测定原理:
磷脂酶C催化水解NPPC,在410nm处有特征吸收峰。
自备实验用品及仪器:
天平、研钵、超速冷冻离心机、可见分光光度计、1 mL玻璃比色皿、恒温水浴锅。
试剂组成和配制 :
提取液:液体50mL×1瓶,4℃保存。
试剂一:液体55mL×1瓶,4℃保存。
试剂二:液体25mL×1瓶,4℃避光保存。
试剂三:液体20mL×1瓶,4℃保存。
测定操作
| 空白管 | 测定管 | |
| 样品(μL) | 100 | |
| 试剂一(μL) | 100 | |
| 试剂二(μL) | 500 | 500 |
| 充分混匀,37℃反应30min | ||
| 试剂三(μL) | 400 | 400 |
| 充分混匀,于1mL玻璃比色皿,蒸馏水调零,测定410nm处吸光值,分别记为A空白管和A测定管,△A=A测定管-A空白管。 | ||
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文献和实验网络 二、磷脂酶C PLC是存在于胞浆膜上一个关键酶,有9种异构体,分为α、β、γ和δ四组。PLC作用于PIP2产生三磷酸肌醇(IP3)和二酰基甘油(DAG),IP3和DAG是 T细胞活化的重要信号。除PLCα组外,其余PLC组均不具有跨膜序列,所以PLC在水解PIP2时必须与细胞膜结合。在T细胞活化过程中,参与信号转导的主要为PLCγ
网络 G蛋白和磷脂酶C G蛋白在TCR/CD3与磷脂酶C(phospholipase C,PLC)的结合过程中起到重要的调节作用。通过G蛋白可使PLC发生活化,从而激活磷脂酰肌酰肌醇代谢途径,引起淋巴细胞活化和增殖。自80年代中期发现G蛋白发现G蛋白及ras等GTP结合蛋白以来,G蛋白与信号转导关系的研究已获得重大突破,因之获得1994年诺贝尔医学和生理学奖。
磷脂酰肌醇途径 首先由激活的SrcPrK和ZAP-70通过LAT使膜结合的磷脂酶C(PLC)分子丁链上的酪氨酸残基发生磷酸化。磷酸化的PLC―γ发挥酶活性,使底物二磷酸磷脂酰肌醇(PIP2)水解成两个成分:三磷酸肌醇(1P3)和二酰甘油(DAG)。IP3可迅速地从膜内侧向胞质溶胶中扩散,一方面打开细胞膜上的钙通道使Ca2+ 进入细胞内,同时开启细胞内钙池(内质网)增加Ca2+ ―的释放,协同提高胞内游离钙的浓度。胞质Ca2+ 含量的上升,激活一种称为钙调
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